磺胺类药物介绍
磺胺类药物为人工合成的抗菌药，是兽药中最早应用的抗生素药物之一，具有抗菌谱广，对革兰氏阳性菌及阴性菌均有抗菌作用，化学性质稳定，使用方便，吸收迅速等优点。磺胺类药物作用机理为干扰细菌的叶酸代谢，从而使细菌的生长、繁殖受到抑制。因其自身特有的优势,磺胺类药物已作为一种抗菌药物被广泛应用于畜禽疾病的治疗中，但它容易在动物体内蓄积，使很多细菌产生耐药性，有潜在的致癌性，会严重威胁人类健康。
逗点生物开发出使用固相萃取柱法检测饲料中磺胺类药物残留，其中磺胺吡啶平均回收率在101.5 %，RSD1.7 %；磺胺甲基嘧啶平均回收率在101.4 %，RSD1.6 %；磺胺二甲基嘧啶平均回收率在100.0 %，RSD1.2 %；磺胺对甲氧嘧啶平均回收率在98.2%，RSD1.6 %，为客户提供关磺胺类药物检测有效的解决方案。
一、实验目的
本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测饲料中磺胺类药物的残留。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。
二、实验目标物
磺胺吡啶(CAS:144-83-2)、磺胺甲基嘧啶(CAS:127-79-7)、磺胺二甲基嘧啶(CAS:57-68-1)、磺胺对甲氧嘧啶(CAS:651-06-9)。
三、应用范围
本方法适用于饲料中磺胺类药物残留的HPLC检测及确证。
四、参考标准
《GB/T 19542-2007食品安全国家标准 饲料中磺胺类药物的测定 高效液相色谱法》。
五、实验材料
biocomma® Copure® 碱性氧化铝500 mg/6 mL(Cat. No. COALB6500)。
六、实验方法
1、样品提取
准确称取1.0 g饲料置于50 mL离心管中，加入20 mL乙腈，于振荡器振荡提取30 min，过滤，滤液备用。
2、SPE柱净化
(1)活化：碱性氧化铝柱使用前用5 mL乙腈活化。
(2)上样：取5 mL滤液装入柱中，令其自然流出，弃去流出液，吹干小柱；用两次2 mL流动相洗脱，收集洗脱液（整个上样、洗脱过程控制流速在1 mL/min内）。
(3)重新溶解：洗脱液经0.22 μm滤膜过滤，滤液待上机测试。
3、HPLC条件
设备：Waters Alliance 2695
色谱柱：InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：270 nm
等度洗脱：A：乙腈 B：0.4 %乙酸水溶液
洗脱方式：等度洗脱，A：B=25：75
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
七、实验结果
1、8.0 mg/kg饲料基质中磺胺类药物的添加回收结果
表1 8.0 mg/kg饲料基质中磺胺类药物的添加回收结果
2、添加水平为8.0 mg/kg磺胺类药物检测的液相色谱图
图1 添加水平为8.0 mg/kg磺胺类药物检测的液相色谱图
结论：饲料中磺胺类药物检测的磺胺吡啶平均回收率在101.5 %，RSD1.7 %；磺胺甲基嘧啶平均回收率在101.4 %，RSD1.6 %；磺胺二甲基嘧啶平均回收率在100.0 %，RSD1.2 %；磺胺对甲氧嘧啶平均回收率在98.2%，RSD1.6 %，满足标准要求。