实验导读
孔雀石绿(Malachite green，MG）属于三苯甲烷类染料，在水产养殖业上，常作为杀菌剂用于预防和治疗各类水产生物，如鱼卵和鱼体中的鳃霉病，水霉病等。孔雀石绿具有高毒性、高残留、高致癌、致突变等危害，被指定为水生生物禁用药物。我国已宣布了严禁在水产养殖中使用孔雀石绿，并规定其不得检出。
逗点生物采用孔雀石绿分子印迹柱，建立了鱼肉中孔雀石绿的液相色谱检测方法。该方法低、中、高三个水平的加标回收率均在85-90 %之间，RSD小于2 %，操作简便快捷，能够作为客户鱼肉中孔雀石绿的参考方法。
一、样品提取
鱼去鳞、皮，沿背脊取肌肉，粉碎均匀后，取鱼肉试样2 g(精确至0.01 g)，加入2 g NaCl，再加入 15 mL 70%乙腈水，涡旋震荡10 min，超声提取10 min，以10000 r/min转速离心5 min，移取全部上清液至离心管中；将所得的上清液中加入等体积的去离子水，混匀，作为待净化液。
二、样品净化
活化：依次用3.0 mL乙腈和3.0 mL去离子水平衡MISPE柱；
上样和淋洗：移取所得样品提取液过柱，再用3.0 mL的水淋洗，弃去淋洗液；
洗脱：用3.0 mL甲醇-乙酸（9:1，V/V）洗脱，收集洗脱液；
重新溶解：洗脱液经氮吹浓缩至近干，用1.0 mL 乙腈溶解，过0.45 μm有机滤膜，进行上机测定。
注：整个过程控制流速不要超过1 mL/min。
三、 、仪器条件
液相色谱条件
仪器：UltiMate 3000（Thermofisher Scientific）
色谱柱：Agilent C18 (4.6 mm×250 mm，5μm)
流动相：乙腈：50mM乙酸铵(0.1%乙酸)=60:40
检测波长：620 nm
流速：1.2 mL/min
柱温：30 ℃
进样量：20 μL
四、实验结果
五、订购信息
