米酵菌酸是由椰毒假单胞菌酵米面亚种产生的一种高毒性代谢毒素，常见于发酵米面制品、变质木耳、银耳等食品中。该毒素具有极强的耐热性和致死性，是近年来多起食物中毒事件的主要元凶。
1、 样品-干银耳的提取（实验全程避光）
称取2.5 g（精确至0.01 g）试样于50 mL离心管中，加入10 mL甲醇-氨水溶液，旋紧盖子，充分混匀，室温下置于暗处浸泡1h后，超声提取30 min，10000 r/min离心5 min，取上清液至25.0 mL容量瓶中，残渣加入10 mL甲醇-氨水溶液重复提取一次，合并提取液，用甲醇-氨水溶液定容至25.0 mL，从中准确移取5.0 mL上清液做为待净化液。
备注：甲醇-氨水溶液，量取80 mL甲醇，加入1.0 mL氨水，加水定容到100 mL，混匀。
2、 试样净化(Copure® MAX SPE 60mg/6mL（货号：COMAX660）；Copure® MAX SPE 150mg/6mL（货号：COMAX6150））
·活化：使用前依次用5 mL甲醇、5 mL水进行活化，保持柱体湿润；
·上样：取5 mL待净化液过柱，弃去上样液；
·淋洗：用5 L水、5 mL甲醇淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱；
·洗脱：用6 mL 5%甲酸甲醇溶液进行洗脱，收集洗脱液，于40℃水浴下氮吹浓缩至近干，用初始流动相定容至1 mL，涡旋混匀1 min，经0.22 μm亲水PTFE滤膜过滤，上机。
备注：用6 mL 2%甲酸甲醇溶液容易洗脱不完全，因此本应用选择6 mL 5%甲酸甲醇溶液进行洗脱。
3、标准工作液的配制
吸取适量米酵菌酸标准储备液，用初始流动相定容，配制称质量浓度为0.02 μg/mL, 0.05 μg/mL, 0.1 μg/mL, 0.2 μg/mL, 0.5 μg/mL的标准工作溶液，临用现配。
备注：用初始流动相配制工作曲线，响应和峰型更优于甲醇配制。
4、 仪器条件
仪器：液相色谱仪，ThermoFisher U3000；
色谱柱：Commasil® C18（4.6 х 250 mm，5.0 μm）；
流动相：A：甲醇，B：水（用甲酸调pH为2.5）；
洗脱方式：等度洗脱，A：B=75：25
柱温：30℃
流速：1.0 mL/min；
检测波长：267 nm；
进样量：20 μL。
5、实验结果
备注：从试验结果中可以看出，SPE柱规格为150 mg/6 mL的回收率更佳。
色谱图
6、注意事项
1. 实验需全程避光。
2. SPE小柱洗脱时改成了“用6 mL 5%甲酸甲醇”进行洗脱。
3. 从试验结果中可以看出，SPE柱规格为150 mg/6 mL的回收率更佳。
7、 订购信息
