煮沸杀菌可用于无菌要求不高的临时培养基,以及含有热敏性成分的培养基(如VRBA、XLD),下面为其核心要点。

一、核心原理

100℃沸水可使微生物菌体蛋白发生不可逆变性,破坏细胞膜结构,从而杀灭多数细菌繁殖体、真菌营养体及部分病毒。但无法彻底杀灭细菌芽孢,因此不适用于无菌要求严格、含芽孢污染风险较高或大容量复杂培养基。

、操作流程

1、称量溶解按标签或说明书称取培养基,加水后加热搅拌至完全溶解。

2分装密封:趁热分装至耐高温容器,预留沸腾空间,用耐高温封口膜封口。

3煮沸杀菌

将密封好的培养基容器平稳放置在电磁炉加热面板中央;

打开电磁炉,调至中高火加热,初期可适当摇晃培养基,防止底部结块、糊底;待培养基表面出现大量气泡、完全沸腾后,立即将容器从电磁炉上拿开,待液面回落后,立即放回电磁炉上加热,重复3次。4后续处理:冷却至适宜温度后,进行添加配套试剂、倾注平皿等操作。三、注意事项

1、确保容器底部与电磁炉面板完全贴合,避免受热不均。

2、加热过程中密切观察,若培养基出现溢出趋势,及时调小火力。

3、含糖、含血清等热敏性成分的培养基,不可长时间煮沸,避免营养成分分解、失效。4、煮沸过程中禁止随意打开容器封口,防止外界杂菌进入。规范操作煮沸杀菌,才能从源头规避污染,助力实验顺利开展。

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