沙门氏菌是常见人畜共患病原菌,广泛存在于畜禽、肉蛋、奶及养殖环境中,既造成养殖损失,也易引发食源性疾病,是动物卫生与食品安全重点防控对象。

此前我国动物及动物产品沙门氏菌检测缺少统一、全流程、覆盖养殖-屠宰-环境的专项方法标准。为此,农业农村部提出、全国动物卫生标准化技术委员会归口,制定GB/T 46668-2025,2025-10-31发布,于2026-05-01正式实施,为动物和动物产品中沙门氏菌检测提供统一标准,助力风险防控与质量安全监管。

本文将围绕检测范围、详细检测流程简单介绍该标准,详细内容请参见原文。

一、检测范围

适用于畜禽、畜禽产品及其生产环境中沙门氏菌检测。

、检测流程

1.样品采集

按要求采集粪便、肉、蛋、器具擦拭、水样等各类样品。

养殖场样品:粪便、饲料、垫料、垫纸、养殖器具擦拭样、直肠 / 泄殖腔拭子、动物组织、禽蛋表面、禽蛋内容物、牛奶;

屠宰场样品:动物胴体擦拭样、肠内容物、屠宰器具擦拭样、分割肉;

环境样品:水样、环境擦拭样、车辆擦拭样。

采样后4℃冷藏、避光,24h内必须处理;超时则4℃±2℃保存,48h内处理。

2.分离培养:预增菌→选择性增菌→分离纯化。

预增菌:BPW缓冲蛋白胨水,37℃、180r/min培养18-24h.

选择性增菌:

粪便样品:MSRV 培养基,42℃培养 24h

其他样品:RV R10 培养基,42℃培养 24h。

分离纯化:接种 XLT4 平板(或GB4789.4-2024中规定的分离琼脂:BS琼脂、HE琼脂、XLD琼脂、沙门氏菌显色培养基),37℃培养 24h,观察典型菌落

XLT4平板上的菌落特征:

鸡白痢 /鸡伤寒沙门氏菌:针尖状、透明、光滑湿润。

其他沙门氏菌:黑色中心、透明晕环。

3.鉴定方法:传统 + 分子,灵活选择。

生化鉴定:按 GB 4789.4 执行。

血清学鉴定:按 GB4789.4 执行,可报具体血清型。

普通 PCR:靶向 stn 基因,扩增 260bp 片段,凝胶电泳判读。

荧光定量 PCR(RT-gPCR):

定性:Ct≤36 阳性,36<Ct≤40 可疑

定量:配标准曲线,精准计算菌量。4.结果报告

(1)阳性报告:对分离培养后的疑似菌落,进行生化试验、PCR检测或荧光定量PCR检测,任一方法结果为阳性,报告样品中检出沙门氏菌;对预增菌液直接进行PCR或荧光定量PCR检测,结果为阳性,同样报告样品中检出沙门氏菌。(2)血清型报告:检出的沙门氏菌经血清学鉴定后,可在报告中注明具体沙门氏菌血清型。

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