国抽2026必看|BJS 202407《食品中富马酸二甲酯的测定》:回收率偏低?逗点生物实操经验分享

一、标准里均质子的作用是什么呢?可以选择不加吗?

均质子核心作用是通过物理剪切与分散作用,将样品基质破碎并使目标物均匀分散在提取溶剂中,提升提取效率。因此,不建议省略。

二、 5.2.2净化部分要求“加入1g无水硫酸钠(3.1.3)”,但逗点的SPE柱不含硫酸钠,是否需要手动添加?

我们在产品研发和实操测试中发现,若将无水硫酸钠、筛板直接预装至SPE柱内,会大幅降低柱体流速,极大降低实验的检测效率,无法满足日常大批量检测需求,因此产品采用无硫酸钠预装的优化设计。

更关键的是,样品前期提取步骤无法实现完全分水,样品溶液中会残留微量水分。若直接上样过柱,残留水分会改变柱内吸附环境,破坏PSA填料的杂质吸附体系,产生洗脱干扰,导致杂质净化不彻底。同时,水分残留还会大幅增加后续氮吹难度,延长吹干时间,间接造成目标物损耗,最终出现回收率偏低、数据波动大的问题。

因此,需要加入1g无水硫酸钠,规避水分带来的实验干扰。

三、 5.2.2净化部分,“以不大于2mL/min的流速通过固相萃取柱(3.4.1),并开始收集”,该如何正确理解?

很多客户在实操时,会误以为“先过柱、再收集”,实则这是导致回收率偏低的常见误区之一。

这款固相萃取柱的核心机理是吸附杂质、洗脱目标物,因此上样前必须提前搭好接收装置,从样品开始过柱的那一刻,就需要同步收集洗脱液。若延迟收集,部分目标物会随初始流出液流失,直接造成回收率偏低,前期实验白费功夫。因此,上样前必须提前摆放好接收装置,样品开始过柱的同时,需同步收集洗脱液,最大程度保留目标物!

四、氮吹环节如何操作,才能避免影响回收率?

逗点生物技术团队通过多次对比实验发现,氮吹环节是影响回收率的关键变量——气流大小对实验结果的影响远超预期。富马酸二甲酯挥发性较强,若氮吹气流过大、风速过急,在溶剂快速挥发的同时,极易造成目标物伴随气流挥发损耗,导致回收率大幅降低、数据重复性差。

因此,(1)氮吹选用最小气流,保持液面轻微波动即可,氮吹温度设置为40℃缓慢氮吹洗脱液,减缓溶剂挥发,避免因气流过大造成目标物损耗;(2)此标准氮吹目的为浓缩,没有发生溶剂交换,因此为了减少氮吹的损失,建议氮吹至1mL左右,再用乙腈定容至2mL,既能达到浓缩要求,也可最大限度留存待测组分,确保回收率稳定。

五、 如何排查是氮吹损失导致回收率低问题呢?

可以选择不浓缩。具体步骤为:收集上样液和洗脱液,用乙腈定容至10mL,混匀后过膜上机测试。若此时回收率正常,即可判定损耗源于氮吹环节,后续再按标准控制好氮吹气流浓缩上机测试即可。

本期色谱小课堂到此结束,如您需要了解更多食品安全检测相关知识,敬请关注逗点生物Copure®

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