一、实验目的
本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测食用油中苯并芘的含量。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。
二、应用范围
本方法适用于食用油中苯并芘的HPLC检测及确证。
三、参考标准
《GB 5009.27-2016 食品安全国家标准 食品中苯并(a)芘的测定》。
四、实验材料
biocomma® Copure®苯并芘专用柱(Cat. No.COBAP6500)。
1、样品提取
(1)准确称取食用油0.4 g，加入5 mL正己烷，涡旋混合0.5 min待净化。
2、SPE净化
(1)活化：苯并芘固相萃取柱使用前依次用5 mL二氯甲烷、5 mL 正己烷活化。
(2)上样和淋洗：往固相萃取柱中加入待净化液；加入5 mL 正己烷淋洗，弃去流出液；加入6 mL二氯甲烷洗脱，收集流出液（整个过程控制流速为1mL/min）。
(4)定容：洗脱液中加1mL乙腈，40℃氮吹至近干，用乙腈定容至1mL，涡旋0.5 min，经0.22 um滤膜过滤，供HPLC测试。
五、实验方法
3、HPLC条件
设备：Waters Alliance 2695
色谱柱：InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)
检测器：Waters 2475荧光检测器
激发波长：384nm 发射波长：406
等度洗脱：乙腈：水=88：12
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
六、实验结果
1、12.5ug/kg食用油中苯并芘的添加回收结果
表112.5ug/kg食用油中苯并芘的添加回收结果
2、添加水平为12.5 ug/kg苯并芘标准液相色谱图
图1 添加水平为 12.5ug/kg食用油中苯并芘液相色谱图
本方法回收率和RSD满足标准要求。