黄曲霉毒素M1的介绍
黄曲霉毒素M1属于黄曲霉毒素一类结构相似的化合物中的一种，在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。哺乳类动物摄入被黄曲霉毒素B1污染的饲料或食品后，通过羟基化作用转化成黄曲霉毒素M1。黄曲霉毒素M1危害主要表现在致癌性和致突变性，对人及动物肝脏组织有破坏作用，可导致肝癌甚至死亡。其毒性是氰化钾的3倍、砒霜的20倍、敌敌畏的30倍，属特别剧毒物质，为强致癌剂。2002年被世界卫生组织列为I类致癌物。
有关黄曲霉毒素M1的食品安全限量规定
中国、美国及日本对乳及乳制品黄曲霉毒素M1 限量标准均为0.500μg/kg，
欧盟为0.050μg/kg。
逗点生物开发出使用SPE方法检测牛奶中黄曲霉毒素M1的含量，平均回收率在95%，为客户提供关于黄曲霉毒素M1检测有效的解决方案。
实验目的
本研究利用免疫亲和柱作为样品的前处理方法，HPLC作为分析方法，检测牛奶中黄曲霉毒素M1的含量。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。
实验目标物
黄曲霉毒素M1(CAS:6795-23-9)
应用范围
本方法适用于牛奶中黄曲霉毒素M1检测HPLC检测及确证。
实验材料
biocomma® Copure® AFMM101免疫亲和柱1 mL (Cat.No.COAFMM101)
实验方法
1．样品提取
称取50g牛奶到具塞离心管中，在水浴中加热到35-37℃。4000转离心15min，除去上层乳脂，剩余溶液全部过玻璃纤维滤纸，滤液待下一步过柱净化。
2．免疫亲和柱净化
(1)将10mL或者50mL注射器连接于免疫亲和柱上端。
(2)处理好的样品滤液以1-2滴/秒的速度通过免疫亲和柱，弃掉流出的液体。
(3)加10mL水淋洗柱子两次，弃掉流出的液体。
(4)用真空泵抽干柱子中的水。
(5)加入4mL甲醇缓慢洗脱，流速约为2-3秒/滴。
(6)在40°下氮吹至近干，加10%乙腈水定容。过0.22um膜待上机。
3．HPLC条件
设 备：岛津HPLC-30A
色谱柱 ：Inertsil®ODS-3 3um2.1×75mm
检测器 ：RF-20A 荧光检测器
检测波长：激发波长：430nm
发射波长: 360 nm
流动相：A:乙腈 B:水
表1 等度洗脱条件
流速：0.3 mL/min
进样体积:10 μL
实验结果
1、1ug/kg牛奶中黄曲霉毒素M1的添加回收结果
表2 1ug/kg牛奶中黄曲霉毒素的添加回收结果
2、添加水平为1 ug/kg牛奶中黄曲霉毒素M1的液相色谱图
图1 添加水平为1 ug/kg牛奶中黄曲霉毒素的液相色谱图
结论：本方法在牛奶中黄曲霉毒素M1检测的平均回收率是95.63%，RSD是2.46%。