《GB 23200.13-2016 茶叶中448种农药及相关化学品残留量的测定》
实验导读：
转眼已至5月下旬，春茶采摘已经接近尾声。茶树经过了半年冬季的休养生息，树芽变得肥硕，色泽翠绿，叶质柔软，且含有丰富的维生素，特别是氨基酸；因此春茶滋味鲜活且香气宜人富有保健作用，赢得了越来越多人的喜爱。春茶虽好，但农药残留的监测也不能忽略，逗点生物依据《GB 23200.13-2016 茶叶中448种农药及相关化学品残留量的测定》采用Copure® 茶叶专用柱对绿茶中40种农药进行添加回收实验，添加水平为0.05 mg/kg时，回收率基本在70%以上，RSD在10%以内，且肉眼可见除杂效果显著，满足绝大部分客户测试要求。
一、样品提取
准确称取10.0 g经粉碎的茶叶于50 mL离心管中，加入30 mL乙腈，2500 rpm涡旋10 min，5000 r/min离心5 min，上清液转移至100 mL鸡心瓶中，残渣加30 mL乙腈，2500 rpm涡旋10 min，5000 r/min离心5 min，上清液转移并入鸡心瓶中，残渣再加20 mL乙腈重复提取一次，合并上清液于鸡心瓶中，45℃水浴旋蒸浓缩至近干，转移至15 mL离心管中，用乙腈定容至5 mL待净化。
二、样品净化（Copure® 茶叶专用柱, 12 mL）
1）活化：茶叶柱加入约2 cm高无水硫酸钠，用5 mL乙腈-甲苯溶液（3:1）预洗柱；弃去流出液
2）上样和洗脱：茶叶柱下接鸡心瓶，取待净化液1 mL过柱，收集流出液；然后加入25 mL乙腈-甲苯溶液（3:1）进行洗脱，收集流出液。
3）重新溶解：洗脱液于45℃氮吹至干，用1 mL 60%乙腈水溶液复溶，过0.22 μm尼龙滤膜供上机测试。
三、标曲配制
1）称取空白茶叶样品10.0 g按照上述一、二步骤进行至氮吹近干，作为空白基质提取液；
2）分别精密量取一定量的混合标准液加入到空白基质提取液中，用60%乙腈水溶液定容至1 mL，配制成适当浓度的基质混合标准工作溶液。
四、仪器条件
4.1 色谱条件
仪器：UPLC-MS/MS（Thermo Fisher TQS Endura）
色谱柱：CommaSil® ODS (2.1 mm×100 mm，3.0 μm)
流动相：A：水（0.1%甲酸） B：甲醇（0.1%甲酸）
洗脱方式：梯度洗脱，见表1
表1 梯度洗脱程序
流速：0.4 mL/min
柱温：35 ℃
进样量：5 μL
4.2 质谱条件
离子源：HESI 电喷雾电压：3500 V
鞘气压力：30 arb 辅气压力：2 arb
离子传输管：380 ℃ 辅气温度：350 ℃
表2 组分名称、保留时间及特征离子一览表（*为定量离子）
五、实验结果
表3 茶叶中多种农药残留加标回收结果（0.5 mg/kg）
注：ND：未检出
茶叶中多种农药检测色谱图如下：
茶叶柱净化效果前后对比图：
六、结果与讨论
（1）该实验采用UPLC-MS/MS进行茶叶中多种农药残留的测定，外标法定量，建议配制基质标曲进行定量，否则会存在基质效应，影响仪器准确定量；
（2）从表3 茶叶中多农残添加回收结果可知：大部分农药回收率都在70%-120%以内，RSD小于10%，可以满足绝大多数客户测试需求。
（3）从茶叶柱净化效果图肉眼可以看出：该法能将茶叶中大部分色素除去，除杂效果佳，极大程度上降低了杂质对目标分析物的干扰。
（4）从表3还可看出：茶叶柱对乙酰甲胺磷、甲磺隆、氯磺隆、胺苯磺隆、多菌灵这几种农药有吸附，造成回收率低或者无回收的现象，如需对这几种农药进行测定，建议采用QuEChERS方法，回收率会得以改善。
七、订购信息
