一、实验目的
本研究利用固相萃取法作为水果蔬菜中农残检测的前处理方法，LC-MS/MS法作为检测手段。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。
二、实验目标物
四种农残标准品：克百威(CAS:1563-66-2)，灭多威(CAS:16752-77-5)，残杀威(CAS:114-26-1)，多菌灵(CAS:63090-40-4)。
三、应用范围
本方法适用于蔬菜和水果中氨基甲酸酯类农药多残留的测定。
四、参考标准
《NY/T 761-2008蔬菜水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定 第三部分》。
五、实验材料
biocomma® Copure® NH2 固相萃取柱 1g/6mL(Cat.No.CONH61000)。
六、实验方法
1、样品提取
称取10.0ｇ韭菜(精确至0.01 g)于50 mL离心管中，加入20 mL乙腈，均质2 min，加入5-7 g氯化钠，盖上盖子剧烈震荡5 min，在室温下静置10 min，5000 r/min离心4 min，使乙腈和水相分层，取乙腈层待净化。
2、SPE柱净化
(1)活化：向NH 柱中加入5 mL甲醇-二氯甲烷(1:99, v/v)活化，弃去流出液。
(2)上样和洗脱：加入待净化液，流速控制在1 mL/min内，收集流出液；用5 mL甲醇-二氯甲烷(1:99, v/v)洗脱，接收流出液；合并流出液。
(3)浓缩定容：40 ℃缓慢氮气流条件下吹至近干(约0.5 mL)后挥干，用1 mL乙腈-0.1%甲酸水溶液(10:90,v/v)定容至1 mL，过0.45 μｍ微孔滤膜，上液相色谱-质谱仪，待测定。
3、LC-MS/MS条件
质谱仪：AB API4000
色谱柱：C18柱(2.1ｍｍX150ｍｍ，5 μｍ)或相当者
流动相：A: 乙腈; B: 0.1%甲酸水溶液
洗脱方式：梯度洗脱
表1 流动相梯度洗脱程序
进样体积：20 μL
柱温：30 ℃
流速：0.3 mL/min或根据仪器条件优化
离子源：电喷雾离子源，正离子模式
检测方式：多反应监测(MRM)
七、实验结果
1、韭菜中农药多残留0.5mg/kg加标回收结果
表2 韭菜中农药多残留0.5mg/kg加标回收结果
2、添加水平为0.5mg/kg韭菜基质中农残检测色谱图
本方法回收率和RSD满足标准要求。