赭曲霉毒素A的介绍
赭曲霉毒素主要有7种结构类似的化合物，其中赭曲霉毒素A毒性最大，产毒量最高、对农产品污染也最严重。赭曲霉毒素A是由多种曲霉菌和青霉菌产生，普遍存在于热带和气候温和的地区，常现于燕麦，大麦，小麦和玉米等农作物上。它对动物和人类的毒性主要有肾脏毒、肝毒及致畸、致癌、致突变和免疫抑制作用，是继黄曲霉毒素后又一个引起世界广泛关注的霉菌毒素。
赭曲霉毒素A的食品安全限量规定
国家食品安全标准《GB 2761-2017》规定谷物、豆类及其制品中赭曲霉毒素A的允许量不得超过5 μg/kg。
逗点生物开发出使用免疫亲和柱法检测大米中赭曲霉毒素A的含量，平均回收率在110.7 %，RSD1.1 %，为客户提供关于赭曲霉毒素A检测有效的解决方案。
一、实验目的
本研究利用免疫亲和柱法作为样品的前处理方法，HPLC作为分析方法，检测大米中赭曲霉毒素A的含量。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。
二、实验目标物
赭曲霉毒素A(CAS: 303-47-9)。
三、应用范围
本方法适用于大米中赭曲霉毒素A含量检测的HPLC检测及确证。
四、实验材料
biocomma® Copure® AFOCH固相萃取柱3 mL (Cat. No. COAFOCH103)。
五、实验方法
1、样品提取
称取5.0 g（精确到0.01 g）大米到50 mL离心管，加25 mL70 %甲醇水溶液，振荡30 min，4000 r/min下离心5 min，取上清液5 mL于15 mL离心管中，加10 mL混合磷酸盐溶液（称取8.0 g 氯化钠，1.2 g磷酸氢钠，0.2 g磷酸二氢钾，0.2 g氯化钾于990 mL水中，浓盐酸调节PH=7.0，定容至1000 mL），混匀待净化。
2、免疫亲和柱净化
(1)上样：取待净化样品5 mL以1-2滴/秒的速度通过免疫亲和柱，弃掉流出的液体。
(2)淋洗和洗脱：加入20 mL水淋洗柱子，分两次淋洗，弃掉流出的液体，抽干小柱；加入3 mL甲醇缓慢洗脱亲和柱，流速约为2-3秒/滴。
(3)重新溶解：40 ℃下氮吹至近干，加1 mL乙腈溶液溶解，0.22 μm滤膜过滤，供HPLC分析。
3、HPLC条件
设备：Waters Alliance 2695
色谱柱：Inertsustain-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2475 荧光检测器
检测波长：激发波长: 274 nm 发射波长: 440 nm
流动相：乙腈：2 %乙酸水溶液=49.5：50.5
流速：1 mL/min
进样体积：20 μL
六、实验结果
1、25.0 μg/kg大米中赭曲霉毒素A的添加回收结果
表1 25.0 μg/kg大米中赭曲霉毒素A的添加回收结果
2、添加水平为25.0 μg/kg大米中赭曲霉毒素A的液相色谱图
图1 添加水平为25.0 μg/kg大米中赭曲霉毒素A的液相色谱图
结论：大米中赭曲霉毒素A检测平均回收率在110.7 %，RSD1.1 %，满足标准要求。