真菌毒素是由真菌在适宜环境条件下产生的一系列有毒次生代谢产物，膳食是人体摄入真菌毒素的主要方式。
食品中检出率较高的真菌毒素主要由曲霉菌属（Aspergillus）、青霉菌属（Penicillium）以及镰刀菌属（Fusarium）等菌属产生，包括黄曲霉毒素（Aflatoxin）、赭曲霉毒素A(Ochratoxin A）、杂色曲霉素（Sterigmatocystin）、展青霉素（Patulin）、伏马菌素（Fumonisin）、玉米赤霉烯酮（Zearalenone）、呕吐毒素（Deoxynivalenol）、雪腐镰刀菌烯醇（NIV）、T-2毒素等。
逗点生物采用最新自主研发的Copure®302多功能净化柱，建立小麦粉中10种真菌毒素检测的LC-MS/MS检测方法。该方法两个水平的加标回收率均在90-100 %之间，RSD小于10%，操作简便快捷，与国内的竞品相比，具有回收率高和除杂净化效果好的优势，能够作为小麦粉中多种真菌毒素检测的参考方法。
一、样品前处理
1.1样品提取
称取 5 g试样于50 mL离心管中，加入20 mL乙腈-水-乙酸溶液（80:19:1），涡旋混匀，置于超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡20 min，在6000 r/min下离心10 min，取上清液备用。
1.2样品净化
1）向玻璃试管中加入10 mL样品提取液。
2）将净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中，并向下压净化柱至试管底端。
3）将净化柱上部净化后的样品提取液取出至样品瓶或EP管中。
4）取5 mL净化提取液，40℃条件下氮气吹至近干，加入乙腈-水（50:50）溶液定容至1 mL，涡旋 30s 溶解残渣，过微孔滤膜，上机分析。
二、仪器条件
仪器设备：UPLC-MS/MS
Thermo Scientific TSQ Endura
色谱柱：Commasil® BEH T-C18
2.1 mm×100 mm,3 μm
流动相： A：5mM乙酸铵（0.1%甲酸）溶液 B：乙腈（0.1%甲酸）溶液
流动相梯度：初始90%A，40%A（0 min~2 min），10%A（2 min~6 min），
10%A（6min~7min），90%A（7min~8min），90%A（8min~10min）
流速：0.3 mL/min
柱温：室温
进样体积：5.0 mL
【质谱条件】
鞘气压力：30 arb 辅气压力：8 arb
离子传输管：300 ℃ 辅气温度：350 ℃
检测方式：多离子反应检测（MRM）
扫描方式：正离子模式（ESI+）和负离子模式（ESI- ）
表1 离子选择参数
三、实验结果
从表2中可知，使用Copure® 302多功能净化柱处理后，得到10种多毒素（黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2，玉米赤霉烯酮，呕吐毒素，T-2毒素，赭曲霉毒素，伏马毒素B1、B2）的回收率均在90-110%之间，RSD小于10 %，整体回收率评价优于国内A品牌。
从图1可知，使用Copure® 302多功能净化柱净化处理样品提取液后，上机液中的杂质干扰减少，目标物信号响应值提高，整体净化效果评价优于国内A品牌，能够满足实验使用需求。
（①小麦粉样品-未净化处理 ②国内A品牌-净化处理 ③Copure®302-净化处理 ）
四、订购信息
逗点生物Copure®多功能净化柱内含有多重吸附基质，可快速、选择性地吸附样品中的脂类、蛋白质、色素等杂质，达到快速净化目的。且规格齐全，保质期长，可满足多种实验需求~
