呕吐毒素,也叫做脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol, DON) ,是一种单端孢霉烯族化合物,由于该毒素能够引起动物呕吐等中毒症状, 故而称为呕吐毒素。小麦作为主食作物,是呕吐毒素分布最广的作物之一。

在小麦生产加工的过程中, 呕吐毒素伴随着面粉的制成存在于小麦粉中,严重危及人们的身体健康。因此,精准快速地检测粮食作物及其制成品中呕吐毒素含量,对于保证食品安全具有重要的意义。

逗点生物采用自主研发的24孔Copure® 230多功能净化板,实现了呕吐毒素的快速、高通量检测。

建立小麦粉中呕吐毒素检测的LC检测方法,LC方法中两个水平(200 ng/g,400 ng/g)的加标回收率均在90-110 %之间,孔间回收率CV值小于5 %。本方法操作简便快捷,具有回收率高和除杂效果好的优势,能够作为小麦粉中呕吐毒素检测的参考方法。

参照《GB 5009.111-2016 食品安全国家标准 食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定 》

一、样品前处理

1.1  样品提取

1)称取2 g样品,加入20 mL乙腈-水溶液(9+1)混合均匀。

2)涡旋15 min后,6000 r/min离心5 min,取上清液,待净化用。

1.2  样品净化

Copure® 230多功能净化板(货号:COAF230-GTL)

1)将24孔净化板放置在24孔收集板上,再向净化板孔中加入6 mL样品提取液。

2)将24孔净化板和收集板放置在24孔正压提取装置下,开启气阀开关,使净化板孔和输气孔保持对应,匹配良好。

3)调整气体输出压力,使样品提取液过滤至收集板中。

4)取4 mL样品净化液,40℃下氮气吹干,用1 mL初始流动相复溶,涡旋30s溶解残渣,过0.22 μm微孔滤膜,上机分析。

二、仪器条件

仪器设备UltiMate 3000,配DAD检测器

(Thermo Fisher Scientific)

色谱柱:Agilent ZORBAX  C18 

(4.6 mm×250 mm,5 μm)

流动相: A:甲醇    B:去离子水  

流动相梯度:见表1

流速:0.8 mL/min

柱温:35℃

进样体积:50.0 mL

检测波长:218 nm

表1  流动相洗脱程序

三、实验结果

图1 使用多功能净化板处理前后的色谱图

①小麦粉样品-未净化处理   ②Copure® 230多功能净化板-净化处理 

从图1中可知,经过Copure® 230多功能净化板净化处理后,上机液中杂质被明显吸附,色谱图中杂峰更少,目标峰旁边无干扰峰,定量更准确;24个孔中呕吐毒素的回收率均在90-110%之间,孔间回收率CV值小于5 %,能满足实验使用需求。

表2  LC方法加标回收实验结果
图2 使用Copure® 230多功能净化板净化后
的加标样品色谱图(200 ng/g)

四、订购信息

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