山奈酚介绍
山奈酚属于黄酮类化合物，广泛存在于各种水果、蔬菜及饮料中，因其具有防癌、抗癌、抗炎、抗氧化、抗菌、抗病毒等多种功效。
异鼠李素介绍
异鼠李素(Isorhamnetin，Iso)是从银杏、沙棘等药用植物中分离提纯的黄酮类化合物，亦广泛存在于其他多种植物的花、果实和叶中。有较好的抗肿瘤、抗心肌缺氧、缺血，缓解心绞痛，抗心律失常，治疗冠心病和高血压，降低血清胆固醇，保护心血管，促进血流通畅等多种生物学效应，广泛应用于临床。
逗点生物开发出使用固相萃取法检测银杏提取物山萘酚和异鼠李素，其中山奈酚平均回收率106.2 %，RSD 1.2 %，异鼠李素平均回收率为100.8 %，RSD 2.3 %，为客户提供关于山奈酚和异鼠李素检测的有效解决方案。
一、实验目的
本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测银杏提取物中山奈酚和异鼠李素的残留。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。
二、实验目标物
山奈酚(CAS: 520-18-3)、异鼠李素(CAS: 480-19-3)。
三、应用范围
本方法适用于银杏提取物中山奈酚和异鼠李素残留的HPLC检测及确证。
四、实验材料
biocomma® Copure® HLB 30 mg/1 mL(Cat. No. COHLB130)。
五、实验方法
1、样品提取
准确称取0.5 g银杏提取物胶囊置于50 mL离心管中，用70 %甲醇水定容至20 mL，于振荡器振荡提取30 min，取0.5 mL溶液到另一个50 mL离心管中，用水定容至20 mL，振荡混匀，溶液备用。
2、SPE柱净化
(1)活化：HLB使用前用1 mL甲醇活化，1 mL水平衡。
(2)上样和洗脱：取1 mL备用液过柱，弃去流出液；用1 mL 5 %甲醇水淋洗，弃去流出液，抽干小柱；用2 mL甲醇洗脱，收集洗脱液。（整个上样、洗脱过程控制流速在1 mL/min内）。
(3)上机测试：取洗脱液1 mL经0.22 μm滤膜过滤，供上机测试。
3、HPLC条件
设备：Waters Alliance 2695
色谱柱：InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2996 紫外检测器
检测波长：363 nm
等度洗脱：甲醇 ：0.1 %甲酸水溶液=70：30
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
六、实验结果
1、10.0 mg/kg银杏提取物基质中山奈酚和异鼠李素的添加回收结果
表1 10.0 mg/kg银杏提取物基质中山奈酚和异鼠李素的添加回收结果
2、山奈酚和异鼠李素检测的液相色谱图
图1 添加水平为10.0 mg/kg山奈酚检测的液相色谱图
图2 添加水平为10.0 mg/kg异鼠李素检测的液相色谱图
实验表明：Copure® HLB对银杏提取物中山奈酚和异鼠李素的回收率和重现性非常理想。