一、实验目的
本研究利用分散固相萃取（QuEChERS）法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测猪肉中的激素类药物多残留。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。
二、应用范围
本方法适用于猪肉中的激素类药物多残留检测及确证。
三、实验材料
biocomma® Copure® 兽残专用QuEChERS提取管50 mL (Cat. No. COQ050050)。
biocomma® Copure® 兽残专用QuEChERS净化管15 mL (Cat. No. COQ015601)。
四、实验步骤
1、样品提取
准确称取粉碎好的猪肉5.0 g于50 mL QuEChERS提取管中，加入10 mL 乙腈，涡旋1min。再加入, QuEChERS盐包(Cat. No. COQ050050)， 用力振摇1 min 4000 r/min离心5 min。上层CH3CN层待净化。
2、样品净化
取待净化的上层CH3CN层6 mL于15 mL QuEChERS净化管(Cat. No. COQ015601)中，涡旋 1 min，4000 r/min离心5 min。取上清液4 mL转移至另一试管中，40 ℃下氮吹至干，用1 mL流动相复溶，过0.22μm滤膜，待上机测试。
3、HPLC仪器条件
设备：Waters Alliance 2695
色谱柱：Phenomenex kinetex® ( 250 mm×4.6 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2996 DAD检测器
检测波长：230 nm
流动相：A：乙腈 B：水
洗脱方式：梯度洗脱
表1 流动相梯度洗脱程序
流速：1 mL/min
进样体积：20 μL
五、实验结果
1、0.5 mg/kg猪肉中激素的添加回收结果
表2 0.5 mg/kg猪肉中激素的添加回收结果
2、 添加水平为0.5 mg/kg猪肉中激素检测的液相色谱图
图1 添加水平为0.5 mg/kg猪肉中激素检测的液相色谱图
本方法回收率和RSD满足标准要求。