抗氧化剂的介绍
食品中的抗氧化剂主要分为化学合成的抗氧化剂和天然的抗氧化剂。目前国际上开发的人工化学合成抗氧化剂种类有上百种,被国际认可的抗氧化剂只有十几种,最经常使用的有BHA,BHT,TBHQ。抗氧化剂可以有效的阻止或者延缓食品氧化变质,因此越来越多的药物和食品添加抗氧化剂以防止药物或者食物变质。
但是,过量的化学合成的抗氧化剂的添加会对人体有一定的伤害,因此检测食品中的抗氧化剂显得尤为重要。新国标《GB5009.32-2016》中明确规定了食品中抗氧化的测试方法,逗点生物根据此新国标开发出食用油中抗氧化剂的固相萃取方法。
实验材料
biocomma®Copure®抗氧化剂专用固相萃取柱
实验方法
1、样品提取
准确称取食用油 1.0 g于50 mL离心管中加入乙腈 10 mL,涡旋2 min分散均匀。4000 r / min离心5 min,取上清液加入鸡心瓶中;再向离心管中加入乙腈 10 mL,重复提取一次,取上清液,合并待净化。
2、SPE柱活化
(1)活化:抗氧化剂专用固相萃取柱使用前用5 mL甲醇、5mL乙腈活化 。
(2)上样和洗脱:往固相萃取柱中加入待净化液,收集;加入10 mL乙腈/甲醇(2/1 v/v)洗脱,收集洗脱液,合并。
(3)重新溶解:洗脱液40 ℃下旋蒸至干,用1 mL 乙腈溶液溶解。经0.22 μm滤膜过滤,供高效液相色谱测定。
3、HPLC条件
设 备:Waters Alliance 2695
色谱柱 :Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250mm)
检测器 :Waters 2487 紫外检测器
检测波长:280 nm
流动相:A:甲醇 B: 0.5%甲酸水
表1 梯度洗脱条件
流速:1.0 mL/min
进样体积:20 μL
实验结果
1、10 mg/kg食用油中抗氧化剂的添加回收结果
表2 10 mg/kg食用油中激抗氧化剂的添加回收结果
2、 添加水平为10 mg/kg食用油中抗氧化剂检测的液相色谱图
图1 添加水平为10 mg/kg食用油中抗氧化剂检测的液相色谱图