4-甲基咪唑（4-MI）是一种有致癌风险的污染物，常作为生产焦糖色素的副产物出现在食品中。
本方案参照国标GB 5009.282-2020，采用Copure®MCX小柱，以百香果汁及蜂蜜为基质样品，建立了不同基质中4-甲基咪唑的液相色谱-串联质谱测定法，低、中、高三水平的加标都能获得满意结果。
一、样品提取
准确称取均匀的样品2.0 g（精确至0.001 g）于50 mL离心管中，加入2 %甲酸水溶液至20 mL，混匀，10000 r/min离心5 min，上清液待净化。
二、 样品净化
活化：依次用5 mL甲醇，5 mL水活化固相萃取小柱。
上样：取待净化样品10 mL过柱，弃掉流出的液体。
淋洗和洗脱：分别加入2 mL 2 %甲酸水、5 mL水、5 mL甲醇淋洗固相萃取小柱，弃去流出的液体；加入8 mL 5 %氨水甲醇洗脱固相萃取小柱，收集洗脱液。
重新溶解：45 ℃下氮吹至近干，加入乙腈-5 mmol/L乙酸铵（9+1）溶液1 mL复溶，涡旋30s，过0.22μm有机系滤膜，上机测试。
三、标准曲线溶液的制备
取适量标液，用乙腈-5 mmol/L乙酸铵（9+1）溶液稀释成浓度分别为10 μg/L、20 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、200 μg/L、400 μg/L的标准上机溶液。
四、 仪器条件
1）色谱条件
仪器：UPLC-MS/MS
(Thermo Fisher TSQ Endura)
色谱柱：GOWON HILIC
(2.1 mm×100 mm，2.7 μm)
流动相：A：5 mmol/L乙酸铵 B：乙腈
洗脱方式：梯度洗脱，见表1
流速：0.6 mL/min
柱温：35℃
进样量：5 μL
2）质谱条件
离子源：HESI
电喷雾电压：3500 V
鞘气压力：35 arb
辅气压力：5 arb
离子传输管：380 ℃
辅气温度：350 ℃
及特征离子一览表（*为定量离子）
五、实验结果
4-甲基咪唑的离子流图
4-甲基咪唑的离子流图
六、订购信息
