《GB 5009.96-2016 食品安全国家标准 食品中赭曲霉毒素A的测定 第二法 离子交换固相萃取柱净化高效液相色谱法》
咖啡作为一种日常饮料，其质量安全至关重要。真菌毒素污染是影响咖啡质量安全的关键风险因子之一，其中赭曲霉毒素A(Ochratoxin A，OTA)是咖啡中最常见的真菌毒素之一。
逗点生物结合自身产品优势，建立了固相萃取-高效液相色谱法测定咖啡豆中OTA含量的方法，试样经提取后，经离子交换固相萃取柱净化后，采用高效液相色谱仪结合荧光检测器测定。经验证，加标回收率范围95-105%，RSD值小于5%，满足测试要求。
一、样本前处理
1.1提取
咖啡豆样品经粉粹后，称取试样粉2.5 g(精确至0.01 g)于50 mL离心管(带盖)中，加入25 mL甲醇-碳酸氢钠溶液(30 g/L)(体积比50：50)于涡旋振荡器振荡提取10 min，8000 r/min离心5.0 min后上清液用滤纸过滤，取10 mL提取滤液待净化。
1.2净化
分别用5.0 mL甲醇、5.0 mL甲醇-碳酸氢钠溶液(30 g/L)(体积比50：50)活化MAX萃取柱，然后将上述待净化提取液加入固相萃取柱，调节流速以1滴/s~2滴/s的速度通过柱子，压干。然后分别依次用5.0 mL淋洗液（0.1 mol/L氢氧化钾溶液：乙腈：水=(3：50：47）、5.0 mL水、5.0 mL甲醇淋洗小柱，抽干。加入5.0 mL洗脱液（甲醇：乙腈：甲酸：水=40：50：5：5），收集洗脱液于玻璃氮吹管中，于45℃下氮气吹至近干。加入1.0 mL乙腈-2%乙酸水溶液(体积比50：50)，涡旋复溶，过滤至进样小瓶中，上液相色谱测试。
1.3过程空白实验
不称取试样，按上述步骤进行实验。
二、仪器条件
设备：Thermo Scientific UltiMate 3000
色谱柱：Commasil®AQ-C18（4.6 mm*250 mm，5 um）
检测器：荧光检测器（激发波长333 nm、发射波长460 nm ）
流动相：A：2%乙酸水 B：乙腈
洗脱方式：梯度洗脱条件见下表1
流速：1 mL/min
进样体积：5 µL
三、实验测试结果
四、订货信息
