黄曲霉素是一类真菌 (如黄曲霉和寄生曲霉) 的有毒代谢产物, 具有很强的致癌性。黄曲霉素M1是黄曲霉素B1的羟基化代谢产物,其毒性与黄曲霉素B1相当,也是一种强致癌物。
当奶牛食用了被黄曲霉素B1污染的饲料后,黄曲霉素B1在动物体内会经过转化生成代谢产物黄曲霉素M1。代谢产物黄曲霉素M1一部分随尿液和乳汁排出,另一部分存于动物细胞的可食用组织中; 其中在乳汁中较为常见,因此,检测生鲜乳中黄曲霉素M1指标具有重要意义。

逗点生物采用Copure® 223多功能净化柱,实现了黄曲霉毒素M族的快速检测。建立牛奶中黄曲霉毒素M1和M2的LC检测方法。两个水平(5 ng/g,10 ng/g)的加标回收率均在90-110 %之间,RSD值小于5 %,整体净化效果和回收率优于国内品牌。
本方法操作简便快捷,具有回收率高和除杂效果好的优势,能够作为牛奶中黄曲霉毒素M族检测的参考方法。
参照 《GB 5009.24-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素M族的测定》。
一、样品前处理
1.1样品提取
称取 4 g试样于50 mL离心管中,加入10 mL乙腈,涡旋混匀,置于超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡20 min,在6000 r/min下离心10 min,取上清液备用。
1.2样品净化

1)向玻璃试管中加入10 mL样品提取液。
2)将净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中,并向下压净化柱至试管底端。
3)将净化柱上部净化后的样品净化液取出至样品瓶或EP管中。
4)取5 mL净化液,氮气吹干,用1 mL初始流动相复溶,涡旋 30s 溶解残渣,过 0.22μm微孔滤膜,上机分析。

二、仪器条件
仪器设备:UltiMate 3000
Thermo Fisher Scientific,配FLD检测器
色谱柱:Agilent ZORBAX C18
4.6 mm×250 mm,5 μm
流动相:A:去离子水 B:乙腈-甲醇(50/50)
流动相洗脱条件:A,70%;B,30%
流速:1.0 mL/min
柱温:室温
进样体积:20.0 mL
检测波长:激发波长360 nm,发射波长430 nm
检测器:荧光检测器(FLD)
三、 实验结果

从图1中可知,经过Copure® 223多功能净化板净化处理后,提取液中杂质被明显吸附,减少了杂质干扰,净化效果优于国内A品牌;从表1中可知,黄曲霉毒素M1和M2的回收率均在90-110%之间,RSD值小于5 %,能满足实验使用需求。

①国内A品牌-净化处理 ②Copure®223-净化处理,③牛奶样品-未净化处理
四、订购信息

逗点生物Copure®多功能净化柱内含有多重吸附基质,可快速、选择性地吸附样品中的脂类、蛋白质、色素等杂质,达到快速净化目的。且规格齐全,保质期长(常温下可有效储存24个月),满足多种实验需求~