黄曲霉素是一类真菌 (如黄曲霉和寄生曲霉) 的有毒代谢产物, 具有很强的致癌性。黄曲霉素M1是黄曲霉素B1的羟基化代谢产物,其毒性与黄曲霉素B1相当,也是一种强致癌物。

当奶牛食用了被黄曲霉素B1污染的饲料后,黄曲霉素B1在动物体内会经过转化生成代谢产物黄曲霉素M1。代谢产物黄曲霉素M1一部分随尿液和乳汁排出,另一部分存于动物细胞的可食用组织中; 其中在乳汁中较为常见,因此,检测生鲜乳中黄曲霉素M1指标具有重要意义

逗点生物采用Copure® 223多功能净化柱,实现了黄曲霉毒素M族的快速检测。建立牛奶中黄曲霉毒素M1和M2的LC检测方法。两个水平(5 ng/g,10 ng/g)的加标回收率均在90-110 %之间,RSD值小于5 %,整体净化效果和回收率优于国内品牌。

本方法操作简便快捷,具有回收率高除杂效果好的优势,能够作为牛奶中黄曲霉毒素M族检测的参考方法。

参照 《GB 5009.24-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素M族的测定》。

一、样品前处理

1.1样品提取

称取 4 g试样于50 mL离心管中,加入10 mL乙腈,涡旋混匀,置于超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡20 min,在6000 r/min下离心10 min,取上清液备用。

1.2样品净化

Copure® 多功能净化柱操作示意图

1)向玻璃试管中加入10 mL样品提取液。

2)将净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中,并向下压净化柱至试管底端。

3)将净化柱上部净化后的样品净化液取出至样品瓶或EP管中。

4)取5 mL净化液,氮气吹干,用1 mL初始流动相复溶,涡旋 30s 溶解残渣,过 0.22μm微孔滤膜,上机分析。

Copure® 多功能净化柱,简单高效,快速净化

二、仪器条件

仪器设备:UltiMate 3000

Thermo Fisher Scientific,配FLD检测器

色谱柱:Agilent ZORBAX  C18

 4.6 mm×250 mm,5 μm

流动相:A:去离子水  B:乙腈-甲醇(50/50)

流动相洗脱条件:A,70%;B,30%

流速:1.0 mL/min

柱温:室温

进样体积:20.0 mL

检测波长:激发波长360 nm,发射波长430 nm

检测器:荧光检测器(FLD)

三、 实验结果

表1   牛奶中黄曲霉毒素M族加标回收实验结果

从图1中可知,经过Copure® 223多功能净化板净化处理后,提取液中杂质被明显吸附,减少了杂质干扰,净化效果优于国内A品牌;从表1中可知,黄曲霉毒素M1和M2的回收率均在90-110%之间,RSD值小于5 %,能满足实验使用需求。

图1  使用多功能净化板处理前后的色谱图(5ng/g)

①国内A品牌-净化处理  ②Copure®223-净化处理,③牛奶样品-未净化处理 

四、订购信息

种类齐全,自如应对不同实验需求

逗点生物Copure®多功能净化柱内含有多重吸附基质,可快速、选择性地吸附样品中的脂类、蛋白质、色素等杂质,达到快速净化目的。且规格齐全,保质期长(常温下可有效储存24个月),满足多种实验需求~

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