霉菌毒素,又称为真菌毒素,是霉菌或真菌在食品或饲料里生长过程中产生的次生代谢产物,目前在自然界中已发现的霉菌毒素有300多种。

其中黄曲霉毒素(AFT)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和 T-2毒素等,广泛存在于饲料及植物性饲料原料中,严重危害畜禽产品的质量安全。

霉菌毒素通过食物链被人体摄入后,会导致肝脏损害,超过一定量后会致癌、致畸并诱发免疫系统疾病。因此,精准快速地检测饲料及饲料原料和食品中毒素含量,对于保证食品安全具有重要的意义。

Copure®多功能净化柱/货号:COAF226

本实验参考标准NY/T 2071-2011,对样品进行提取,采用226多功能净化柱进行净化处理,建立了液相色谱-串联质谱检测饲料中黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和T-2毒素的方法。

该方法操作简单快速,通过低、中、高三水平加标实验验证,回收率稳定,能满足日常检测需求,供参考。

一、样品提取

称取5.0 g试样于50 mL离心管中,加入25 mL乙腈-水溶液(84:16),涡旋混匀3 min,置于超声波清洗器提取20 min,中间振荡2~3次,取出,于10000 r/min离心5 min,待净化用。

biocomma® 多管涡旋混匀仪/货号:SDC-3000-D

二、样品净化

1) 向玻璃试管中加入10 mL样品提取液。

2) 将 biocomma Copure® 226多功能净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中,并向下压净化柱至试管底端。

3) 将净化柱上部净化后的样品提取液取出至样瓶或EP管中。

4) 取5 mL净化提取液,氮气吹干,用1 mL 20% 乙腈溶液复溶,涡旋超声溶解残渣,过0.22 μm微孔滤膜,上机分析。

三、 标曲配制

将同种类基质空白样品按样品提取和样品净化步骤进行提取、净化,分别吸取一定量的混合标准溶液,添加到空白样品净化提取液中。

混匀后,同样品置于氮吹仪45 ℃下吹干,用1 mL 20% 乙腈溶液复溶,配制成上机浓度分别为2 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL。

四、 仪器条件

【液相部分

色谱柱:Commasil® BEH T-C18

(2.1 mm×100 mm,3 μm)

流动相:A:5 mmol/L乙酸铵溶液  

B:甲醇(含0.1%甲酸)

流速:0.3 mL/min   柱温:30℃   

进样量:5 μL   洗脱程序:见表1

表1 梯度洗脱程序

【质谱条件】

离子源:HESI     

扫描方式:正离子模式(ESI+)和负离子模式(ESI- )

鞘气压力:30 arb    辅气压力:8 arb    

离子传输管:300 ℃    辅气温度:350 ℃

表2 组分名称、及特征离子一览表(*为定量离子)

五、 实验结果

测试数据】

表3 加标回收率结果

测试色谱图

图1 加标水平为10.0 μg/kg的样品EIC图

六、 订购信息


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