霉菌毒素,又称为真菌毒素,是霉菌或真菌在食品或饲料里生长过程中产生的次生代谢产物,目前在自然界中已发现的霉菌毒素有300多种。
其中黄曲霉毒素(AFT)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和 T-2毒素等,广泛存在于饲料及植物性饲料原料中,严重危害畜禽产品的质量安全。
霉菌毒素通过食物链被人体摄入后,会导致肝脏损害,超过一定量后会致癌、致畸并诱发免疫系统疾病。因此,精准快速地检测饲料及饲料原料和食品中毒素含量,对于保证食品安全具有重要的意义。
本实验参考标准NY/T 2071-2011,对样品进行提取,采用226多功能净化柱进行净化处理,建立了液相色谱-串联质谱检测饲料中黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和T-2毒素的方法。
该方法操作简单快速,通过低、中、高三水平加标实验验证,回收率稳定,能满足日常检测需求,供参考。
一、样品提取
称取5.0 g试样于50 mL离心管中,加入25 mL乙腈-水溶液(84:16),涡旋混匀3 min,置于超声波清洗器提取20 min,中间振荡2~3次,取出,于10000 r/min离心5 min,待净化用。
二、样品净化
1) 向玻璃试管中加入10 mL样品提取液。
2) 将 biocomma Copure® 226多功能净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中,并向下压净化柱至试管底端。
3) 将净化柱上部净化后的样品提取液取出至样瓶或EP管中。
4) 取5 mL净化提取液,氮气吹干,用1 mL 20% 乙腈溶液复溶,涡旋超声溶解残渣,过0.22 μm微孔滤膜,上机分析。
三、 标曲配制
将同种类基质空白样品按样品提取和样品净化步骤进行提取、净化,分别吸取一定量的混合标准溶液,添加到空白样品净化提取液中。
混匀后,同样品置于氮吹仪45 ℃下吹干,用1 mL 20% 乙腈溶液复溶,配制成上机浓度分别为2 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL。
四、 仪器条件
【液相部分】
色谱柱:Commasil® BEH T-C18
(2.1 mm×100 mm,3 μm)
流动相:A:5 mmol/L乙酸铵溶液
B:甲醇(含0.1%甲酸)
流速:0.3 mL/min 柱温:30℃
进样量:5 μL 洗脱程序:见表1
【质谱条件】
离子源:HESI
扫描方式:正离子模式(ESI+)和负离子模式(ESI- )
鞘气压力:30 arb 辅气压力:8 arb
离子传输管:300 ℃ 辅气温度:350 ℃
五、 实验结果
【测试数据】
【 测试色谱图 】
六、 订购信息
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