一、实验目的
本研究利用分散固相萃取（QuEChERS）法作为样品的前处理方法，GC-ECD和LC-MS/MS法作为分析方法，检测大米中的农药多残留。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。
二、应用范围
本方法适用于含脂类和蜡类物质较多的水果、蔬菜和谷物等中农药多残留检测及确证。
三、参考标准
《AOAC Official Method 2007.01: Pesticide Residues in Foods by Acetonitrile Extraction and Partitioning with Magnesium Sulfate》。
四、实验材料
biocomma® Copure® QuEChERS提取管50 mL(Cat. No. COQ050020)。
biocomma® Copure® QuEChERS净化管15 mL(Cat. No. COQ015033)。
五、实验步骤
1、样品提取
将大米在-18℃下冷冻，彻底粉碎。准确称取粉碎好的大米15.0 g于50 mL离心管中，加入15 mL 1%乙酸乙腈溶液，再加入QuEChERS萃取盐包（6 g无水硫酸镁和1.5 g无水醋酸钠），用力振摇1 min，4000 r/min离心5 min。上层乙腈层待净化。
2、净化管净化
取待净化的上层乙腈层8 mL于15 mL QuEChERS净化管(1.2 g MgSO4、400 mg PSA和400 mg C18)中，涡旋 1 min，4000 r/min离心5 min。取上清液1 mL，过0.22 μm滤膜，待上机测试。
3、仪器条件
1.GC-ECD条件
气相仪器：Agilent 7890A
色谱柱：HP-5柱；30 m×0.32 mm×0.25 μm或者相当者
进样口温度：220 ℃
检测器温度：300 ℃
升温程序：
180 ℃(保持2 min)
以10 ℃/min升温到230 ℃(保持2 min)
以2 ℃/min升温到260 ℃(保持2 min)
以25 ℃/min升温到270 ℃(保持1.6 min)
载气：氦气
流速：1.6 mL/min
进样方式：分流进样，分流比10:1
2.LC-MS/MS条件
色谱柱：Venusil ASB C18(2.1 mm×150 mm, 5 μm)
质谱仪：API 4000
流动相：A: 0.1% HCOOH+10 mM乙酸铵(取1 mL HCOOH和0.77 g乙酸铵至1 L水溶液中)
B: 甲醇
洗脱方式：梯度洗脱
表1 流动相梯度洗脱程序
流速：0.35 mL/min
柱温： 40 ℃
进样体积：5 μL
离子源：电喷雾(ESI)
扫描模式：正离子模式
检测方式：多反应监测(MRM)
表2 质谱仪离子源参数
表3 氨基甲酸酯类农药各组分名称、保留时间及母离子和子离子检测离子对
六、实验结果
1、大米中农药多残留的添加回收结果
表4 0.2 mg/kg大米中有机氯类、拟除虫菊酯类农药多残留的添加回收结果
表5 0.05 mg/kg大米中氨基甲酸酯类农药多残留的添加回收结果
2、大米中农药多残留检测色谱图
图1 添加水平为0.2 mg/kg大米中有机氯和拟除虫菊酯类农药多残留检测色谱图
图2 添加水平为0.05 mg/kg大米中氨基甲酸酯类农药多残留检测色谱图
本方法回收率和RSD满足标准要求。