对乙酰氨基酚简介
对乙酰氨基酚,别称泰诺林、必理通、百服宁,为苯胺类解热镇痛药;其解热、镇痛作用强度与阿司匹林类似,对凝血机制无影响。其作用机理是通过抑制前列腺素的合成从而发挥解热、镇痛的作用,是目前应用最为普遍的退热药之一。该物质在合理剂量使用下安全性高,但剂量过大或者长期服用会损坏人体的肝肾功能。
逗点生物开发出使用固相萃取法检测猪肉中对乙酰氨基酚,回收率81.73 %,RSD 2.11 %,为客户提供关于对乙酰氨基酚检测有效的解决方案。
一、实验目的
本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法,HPLC法作为分析方法,检测猪肉中对乙酰氨基酚的含量。该方法可简化样品的前处理过程,节省有机溶剂的使用,操作简便。
二、实验目标物
对乙酰氨基酚(CAS:103-90-2)
三、应用范围
本方法适用于肉制品中对乙酰氨基酚检测的HPLC检测及确证。
四、实验材料
biocomma® Copure® 对乙酰氨基酚专用柱60 mg/3 mL。
五、实验方法
1、样品提取
准确称取猪瘦肉2 g,加入10 mL乙酸乙酯,震荡、涡旋2 min,4000 r/min离心5 min取乙酸乙酯层;向猪肉中再加入乙酸乙酯10 mL重复提取一次;合并乙酸乙酯提取液,于50 ℃氮吹至近干,6 mL水溶解,正己烷5 mL×2次除脂,弃去正己烷,水层备用。
2、SPE净化
(1)活化:对乙酰氨基酚专用柱使用前用5 mL甲醇、5 mL水活化;
(2)上样和洗脱:将提取备用液装入柱中,加入5 mL 5 %甲醇水溶液淋洗,弃去淋洗液;8 mL甲醇溶液洗脱,收集洗脱液(整个上样、洗脱过程控制流速在1 mL/min内);
(3)重新溶解:洗脱液在40 ℃下氮吹至近干,1 mL甲醇定容,0.22 μm滤膜过滤,滤液待上机测试。
4、HPLC条件
设备: Waters Alliance 2695
色谱柱:Welch Ultimate XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器:Waters 2487 紫外检测器
等度洗脱:A:乙腈 B:0.05 mol/L磷酸氢二钾溶液(PH=2.3)
洗脱方式:A:B=5:95
流速:1.0 mL/min
检测波长:250 nm
进样体积:20 μL
七、实验结果
1、1 mg/kg猪瘦肉基质中对乙酰氨基酚的添加回收结果
表1 1 mg/kg猪瘦肉基质中对乙酰氨基酚的添加回收结果
2、1 mg/kg对乙酰氨基酚标准液相色谱图
图1 1 mg/kg对乙酰氨基酚标准液相色谱图
结论:猪肉中对乙酰氨基酚检测的平均回收率是81.73%,RSD是2.11%,满足标准要求。