展青霉素介绍
展青霉素又称棒曲霉素，是一种由曲霉和青霉等真菌产生的次级代谢产物，在酸性环境中比较，主要污染水果及其制品，尤其是苹果、山楂、梨、番茄、苹果汁和山楂片等。展青霉素对人类危害严重，有影响生育、致癌和免疫等毒理作用，同时也是一种神经毒素，能导致反胃和呕吐，同时损害呼吸和泌尿等系统，使人神经麻痹、肺水肿和肾功能衰竭。
展青霉素安全限量
国标《GB 2761-2017 食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》规定水果及其制品（仅限于苹果和山楂制成的产品）中展青霉素最大允许限量为50 μg/kg。
一、实验目的
本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测果汁中展青霉素的含量。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。
二、实验目标物
展青霉素(CAS:149-29-1)。
三、应用范围
本方法适用于果汁中展青霉素检测的HPLC检测及确证。
四、实验材料
biocomma® Copure® MAX固相萃取柱 200 mg/6 mL(Cat. No.COMAX6200)。
五、实验方法
1、样品提取
(1)准确称取果汁2.0 g于15 mL离心管中，加入3 mL水（pH=6.0）备用。
2、SPE净化
(1)活化：MAX固相萃取柱使用前依次用5 mL甲醇、5 mL水活化。
(2)上样和洗脱：往固相萃取柱中加入备用液；加入5 mL水淋洗，抽干小柱；加入8 mL甲醇洗脱，收集洗脱液（整个上样洗脱过程控制流速在1 mL/min内）。
(4)重新溶解：洗脱液于40 ℃氮吹近干，用乙酸水溶液(1:25，v/v)定容至2 mL，涡旋混匀，过0.22 μm滤膜，供HPLC测试。
3、HPLC条件
设备：Waters Alliance 2695
色谱柱：InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：276 nm
梯度洗脱：A：乙腈 B：水
表1 梯度洗脱条件
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
六、实验结果
1、0.5 mg/kg果汁中展青霉素的添加回收结果
表2 0.5 mg/kg果汁中展青霉素的添加回收结果
2、添加水平为1.0 mg/L展青霉素标准溶液高效液相色谱图
图1 添加水平为1.0 mg/L展青霉素标准溶液高效液相色谱图
结论：本方法回收率和RSD满足标准要求。