一、实验目的
本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测食品中赭曲霉毒素的残留。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。
二、实验目标物
赭曲霉毒素(CAS:303-47-9)。
三、应用范围
本方法适用于粮油中赭曲霉毒素A残留的HPLC检测及确证。
四、参考标准
GB5009.96—2016《食品安全国家标准 食品中赭曲霉毒素A的测定》。
五、实验材料
biocomma® Copure® MAX 150 mg/6 mL(Cat. No. COMAX6150)。
六、实验方法
1、样品提取
珍珠米
准确称取粉碎好珍珠米5.0 g置于50 mL离心管中，加入25 mL提取液（0.1mol/L氢氧化钾溶液：甲醇：水=2:60:38），于振荡器振荡提取20 min，4000 r/min离心5 min，取上层液5 mL备用。
酱油
准确称取酱油5.0 g置于50 mL离心管中，加入20 mL提取液（同1.1），于振荡器中提取20 min，4000 r/min离心5 min，取5 mL提取液备用。
2、SPE柱净化
(1)活化：MAX使用前用5 mL甲醇活化，3 mL水，3 mL提取液（同1.1）平衡。
(2)上样和洗脱：取5 mL备用液过柱，弃去流出液；分别加3 mL淋洗液(0.1mol/L氢氧化钾溶液：乙腈：水=3:50:47)，3 mL水，3 mL甲醇淋洗小柱，弃去流出液，抽干小柱；用5 mL洗脱液(甲醇：乙腈：甲酸：水=40:50:7.5:2.5)洗脱，收集洗脱液（整个上样、洗脱过程控制流速在1 mL/min内）。
(3)上机测试：洗脱液于50 °C下用氮气吹干，用1 mL初始流动相（2 %乙酸水：乙腈=50.5:49.5）定容，经0.22 μm滤膜过滤，供上机测试。
3、HPLC条件
设备：Waters Alliance 2695
色谱柱：InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm,5μm)
检测器：Waters 2475荧光检测器
检测波长：激发波长333 nm 发射波长477 nm
等度洗脱： A：2 %乙酸水 B：乙腈=50.5：49.5
洗脱方式：等度洗脱, A : B=50.5 : 49.5
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
七、实验结果
1、4.0 μg/kg食品基质中赭曲霉毒素的添加回收结果
表1 4.0 μg/kg食品基质中赭曲霉毒素的添加回收结果
2、 添加水平为4.0 μg/kg赭曲霉毒素检测的液相色谱图
图1 添加水平为4.0 μg/kg赭曲霉毒素检测的液相色谱图
本方法回收率和RSD满足标准要求。