一、实验目的
本实验利用固相萃取法作为皮革样品的前处理方法，对Copure™ 皮革脱色柱进行评价。
二、实验目标物
六价铬(Cr6+ )。
三、应用范围
本方法使用于皮革样品的脱色以及六价铬含量的测定。
四、参考标准
《GB/T 22807-2008《皮革和毛皮 化学实验 六价铬含量的测定》和《EN ISO 17075-2007 皮革–化学试验–铬(VI)含量的测定》。
五、实验材料
biocomma® Copure® 皮革脱色柱 500mg/6mL(Cat.No.COCR6500) 。
六、实验方法
1、样品提取
(1)称取2 g剪碎的皮革样品，吸取100 mL脱气后的萃取液(22.8 g三水磷酸氢二钾溶于1 L水中，用磷酸调节pH至8 ± 0.1，再用氮气或氩气排出氧气) 加入皮革样品，盖上瓶塞。
(2)在机械震荡器上震荡3 h，萃取Cr6+ 。
(3)萃取完成后，通过薄膜滤器将锥形瓶中的溶液过滤，待净化。检查溶液的pH值，应为7.5 – 8.0，如果不在此范围，则需重新提取。
2、SPE柱净化
(1)活化：5 mL甲醇，5 mL水，10 mL萃取液。
(2)上样和洗脱：取10 mL待净化液过柱，收集流出液于25 mL容量瓶中，用10 mL萃取液洗脱，一并收集，用萃取液定容至刻度。
3、六价铬含量测定
(1)移取净化后的溶液于25 mL容量瓶中，用萃取液稀释至容量瓶的3/4，加入0.5 mL磷酸溶液和0.5 mL二苯卡巴肼溶液(1%，酸性) 用萃取液定容，摇匀，静置15 min。
(2)以空白溶液按上述操作显色，作为参比溶液。
(3)每次测试样品，同时取净化后的溶液于25 mL容量瓶，不加显色剂，直接用萃取液定容。
(4)将上述溶液用1 cm比色皿在540 nm处测量吸光度。
七、脱色效果
图1 Copure® 皮革脱色专用柱脱色效果
如图1所示， Copure® 皮革脱色专用柱没有被色素穿透，净化后样品几乎无色。
八、实验结果
1、校正曲线绘制
配制1 μg/mL的六价铬标准溶液，使用7个不同浓度的溶液绘制校正曲线。移取一定体积的标准溶液，加入显色剂并用萃取液定容，15 min后比色。同时以空白溶液按同样操作进行显色，作为参比。以六价铬浓度(1 μg/mL)作为X轴，以吸光度作为Y轴绘制标准曲线。(图2)
2、皮革样品中0.4ppm加标回收结果
表1皮革样品中0.4ppm加标回收结果
