一、实验目的
本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测人参中的人参皂苷。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。
二、实验目标物
人参皂苷Re (CAS:52286-59-6)。
三、应用范围
本方法适用于人参中人参皂苷Re的检测的HPLC检测及确证。
四、实验材料
biocomma® Copure® C18固相萃取柱500 mg/6 mL(Cat.No.COC186500)。
五、实验步骤
1、样品提取
准确称取人参粉末0.2g于2 mL离心管中加入甲醇1mL;涡旋1 min分散均匀;超声5min，12000 r / min离心5 min。取上清液，重复提取5次，混合上清液；40℃氮吹至干，4 mL水超声溶解，备用。
2、SPE活化净化
(1)活化：biocomma® Copure® C18固相萃取柱使用前用5 mL甲醇、5 mL 水活化。
(2)上样和洗脱: 往固相萃取柱中加入提取备用液，弃去流出液；加入5 mL水淋洗，弃去淋洗液；抽干。5 mL15%乙腈水溶液洗脱，收集洗脱液。（整个上样淋洗洗脱过程中流速保持1 mL/min）
(3)上机测试:洗脱液取1 mL，0.22 um滤膜过滤，供HPLC上样测试。
3、HPLC条件
设 备：Waters Alliance 2695
色谱柱 ：Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250mm)
检测器 ：Waters 2487 紫外检测器
流动相： A：乙腈 B：0.025 mol/L磷酸二氢钾
洗脱方式：梯度洗脱
表1: 梯度洗脱条件
流速：1.0 mL/min
检测波长：203 nm
进样体积: 20 μL
六、实验结果
1、2 mg/g人参基质中人参皂苷Re的添加回收结果
表1 2 mg/g人参基质中人参皂苷Re的添加回收结果
2、添加水平为2 mg/g人参中人参皂苷Re检测的液相色谱图
图1 添加水平为2 mg/g人参中人参皂苷Re检测的液相色谱图
本方法回收率和RSD满足标准要求。