众所周知，地沟油是是一种质量极差、极不卫生的非食用油，主要指在生活中存在的各类劣质油，如回收的食用油、反复使用的炸油等。一旦食用“地沟油”，会破坏人类的白血球和消化道黏膜，引起食物中毒，甚至致癌的严重后果。因此，“地沟油”在食品安全领域是严禁使用的。但是，一些不法商贩受利益驱动私自生产加工“地沟油”，并充当食用油低价销售给部分小餐馆，给人们的身心都带来极大伤害，因此，“地沟油”的鉴别势在必行。
逗点生物开发出使用固相萃取方法检测食用油中辣椒素的含量，鉴别“地沟油”，其中天然辣椒素平均回收率73.6%，RSD 4.8%，合成辣椒素平均回收率88.3%，RSD 3.8%。
一、实验目的
本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测油类基质中辣椒素含量，识别“地沟油”。该法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。
二、实验目标物
天然辣椒素(CAS: 404-86-4)、合成辣椒素(CAS: 2444-46-4)。
三、应用范围
本方法适用于“地沟油”中辣椒素含量的HPLC检测及确证。
四、实验材料
biocomma® Copure® C18固相萃取小柱 500 mg/6 mL(Cat. No. COC186500)。
五、实验方法
1、样品提取
准确称取0.5 g试样于50 mL离心管中，加入500 μL二氯甲烷，再加入3 mL 2% NaOH溶液，涡旋10 min，混匀，4000 r/min 离心10 min,移出水层，残余物再用3 mL 2% NaOH溶液重复提取一次，合并水相，用稀硫酸（水+浓硫酸=1:15，v/v）调节pH至2～3之间，备用。
2、SPE柱净化
(1)活化：C18柱使用前用5 mL乙腈、5 mL水活化。
(2)上样和洗脱：取备用液全部过柱，弃去流出液；加5 mL水淋洗，弃去流出液；抽干小柱，加5 mL乙腈洗脱，收集洗脱液（上样、洗脱过程流速控制在1 mL/min内）。
(3)上机测试：洗脱液于50 ℃氮吹至近干，用1 mL 80%甲醇水溶液溶解，经0.45 μm有机滤膜过滤，供上机测试。
3、HPLC条件
设备：Waters Alliance 2695
色谱柱：InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2475 荧光检测器
检测波长：激发波长：229 nm 发射波长：320 nm
流动相：A：水 B：甲醇
洗脱方式：等度洗脱，A：B=20：80
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
七、实验结果
1、0.5 mg/kg油样基质中辣椒素的添加回收结果
表1 0.5 mg/kg油样基质中辣椒素的添加回收结果
2、添加水平为0.5 mg/kg辣椒素检测的液相色谱图
图1 添加水平为0.5 mg/kg天然辣椒素检测的液相色谱图
图2 添加水平为0.5 mg/kg合成辣椒素检测的液相色谱图
本方法回收率和RSD满足标准要求。