Copure® MCX | 动物性食品中β-受体激动剂残留量的测定！

GB 31658.22-2022《食品安全国家标准动物性食品中β－受体激动剂残留量的测定液相色谱-串联质谱法》于2023.02.01正式实施，同时此方法在食品安全监督抽检实施细则（2023年版）中同时进行了更新。

本方法采用Copure®MCX柱，测试了猪肉和猪肝中的18种β－受体激动剂，建立了一份具有良好回收率及稳定性，能满足国标要求的SPE-HPLC-MS/MS方法，可供参考。

一、样本前处理

1.1 样品酶解与提取

称取2g猪肉样品于50mL聚丙烯离心管中，加入0.2mol/L的乙酸铵缓冲溶液6mL、β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶40μL，涡旋混匀，37℃避光水浴振荡16h，放置至室温，备用。

1.2 萃取、净化与浓缩

1）取备用液，加入20ng/mL内标工作液125μL ，涡旋混匀，于9500r/min离心5min，取上清液于另一个50mL离心管中，加入0.1mol/L高氯酸溶液5mL，涡旋混匀，用高氯酸调pH值至1.0±0.2，于9500r/min离心5min后，取上清液于另一个50mL离心管中，用10mol/L NaOH溶液调PH值至10±0.5。

2）用15mL乙酸乙酯提取，振荡5min，9500r/min离心5min ，取上层有机相；再加入10mL叔丁基甲醚提取，振荡5min，9500r/min 离心5min，取上层有机相，合并有机相，40℃下氮吹至近干，用2%甲酸溶液5mL溶解，备用。

3）用3mL甲醇3mL2%甲酸溶液依次活化MCX混合型阳离子交换固相萃取柱，取全部备用液过柱；用3mL2%甲酸溶液、3mL甲醇依次淋洗，抽干；用5mL5%氨化甲醇溶液洗脱，洗脱液于 40℃下氮吹至近干，加入0.5mL甲醇-0. 1%甲酸溶液 (10+90，V/V) 溶解，过0.22μm微孔滤膜，上机测定。

1.3 标准曲线的制备

精密量取混合标准工作液、混合内标工作液适量，用甲醇-0.1%甲酸溶液 (10+90，V/V) 稀释成浓度为0.500ng/mL、1.00ng/mL、2.00 ng/mL、5.00ng/mL、10.0ng/mL、20.0 ng/mL的系列标准工作液，内标为5.00ng/mL ，上机测定。

二、仪器条件

仪器设备：液相色谱串联质谱仪

(Triple Quad 5500+)

色谱柱：ZORBAX RRHD Eclipse Plus 95Å C18, 2. 1 x 100 mm, 1.8 µm

流动相：A：0. 1%甲酸水 B ：乙腈

流动相梯度：初始 98%A，98%A (0min~0.3min)，10%A(0.3min~3.0 min)，10%A(3.0min~4.0min)，98%A (4.0min~4.2min)，98%A (4.2min~6.0min)

流速：0.3 mL/min

柱温：室温

进样体积：4.0L

质谱条件：