Copure® 黄曲霉毒素总量免疫亲和柱:国货之光,为降本增效添一抹亮色

在2025年,食品检测机构因检测耗材成本高等问题,急需降本增效。逗点生物自2006年创立后,凭借在生命科学领域的深厚技术底蕴和强大创新能力,推出的Copure®黄曲霉毒素总量免疫亲和柱性能卓越。该产品在关键指标(如回收率)上与进口竞品相当,在针对花生油中黄曲霉毒素B族和G族的测定实验中,不同毒素种类及多样的加标浓度下,与进口产品回收率难分高下,且检测准确度和可靠性与进口产品相媲美。

一、样本处理

提取

   称取花生油5g(精确至0.01g)于50mL离心管中,准确加入20mL乙腈-水溶液(84+16),涡旋混匀,于涡旋振荡器振荡上振荡20min,10000r/min离心5min。准确移取4mL上清液加入46mLPBS稀释混匀,作为上样液。

PBS缓冲盐溶液:称取8.00g氯化钠、1.20g磷酸氢二钠、0.20g磷酸二氢钾、0.20g氯化钾,用900mL水溶液,用盐酸调节pH至7.0,用水定容至1000mL。

净化

  先将低温下保存的免疫亲和柱恢复至室温。免疫亲和柱上接上50mL注射器筒,将上样液加入到50mL注射器筒后,再拧开下端的下盖,和亲和柱保护液一起流出,控制样液以1mL/min-3mL/min的速度稳定下滴。待样液滴完后,往注射器筒内加入2х10mL水。待水滴完后,压干小柱,在亲和柱下部放置15mL离心管,取下50mL注射器筒,2х1mL甲醇洗脱亲和柱,控制样液以1mL/min-3mL/min的速度下滴,最后压干小柱,收集全部洗脱液。在45℃下氮吹至近干,加入1mL 50%甲醇水复溶,过0.22μm亲水PTFE滤膜,上机测试。

二、仪器条件

设备:岛津Shimadzu LC-20A液相色谱仪

色谱柱:Copure®真菌毒素专用HPLC柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)

检测器:荧光检测器(激发360nm 发射440nm) 

光化学柱后衍生器

流动相:水-甲醇(55+45,v/v)

洗脱方式:等度洗脱

流速:1 mL/min

进样体积:10 µL

三、测试结果

测试谱图

图1 黄曲霉毒素B1、G1曲线浓度点为0.5ng/mL, 黄曲霉毒素B2、G2曲线浓度点为0.25ng/mL的液相色谱图
图2 花生油中黄曲霉毒素B1、G1添加浓度为1ng/mL,黄曲霉毒素B2、G2添加浓度为0.5ng/mL的液相色谱图(Copure®
图3 花生油中黄曲霉毒素B1、G1添加浓度为1ng/mL, 
黄曲霉毒素B2、G2添加浓度为0.5ng/mL的液相色谱图(进口R)

四、注意事项

  • 实验中使用到的玻璃器皿或者离心管,一定要清洗干净,尤其是用次氯酸等处理过的,否则会使结果偏低。
  • 上样前样液中的有机相的浓度甲醇不超过25%,乙腈不超过20%,除此之外建议过滤纸,能除掉颗粒较大的杂质。无法满足时可用离心代替,使样液澄清。
  • 稀释后的样液建议30min内上柱,放置时间久会有沉淀析出,会反过来吸附毒素,也会堵柱,影响过柱的效果。
  • 免疫亲和柱最适使用温度为25℃左右,上样和淋洗前避免干柱,干柱的时间越久,凝胶收缩得越厉害,结果不理想。
  • 当用氮气浓缩洗脱液时,氮气流不要太大,否则会损失部分目标物。
  • 在依据 GB 5009.22-2016 《食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素 B 族和 G 族的测定》对柱子进行验收时,通常要确保加标量与柱子的柱容量相匹配。尤其是采用黄曲霉毒素 B 族和 G 族混标进行验证时,必须考虑黄曲霉毒素 B 族和 G 族标液的总量,防止出现回收率验证结果偏低的情况。另外,您也可以选购Copure®高柱容量的黄曲霉毒素总量免疫亲和柱防止这种情况发生。

五、订购信息

发表评论

邮箱地址不会被公开。 必填项已用*标注

*