在鸡蛋的兽残检测过程中,常常会遇到柱子堵塞的问题,这主要是因为鸡蛋基质中含有较多的脂质、蛋白质和其他干扰物质,这些成分在样品前处理和色谱分析中可能导致较大的阻力,影响分离效果。因此,鸡蛋基质的兽残检测相比于一般样品基质来说,处理难度更高,过柱的难度也更大。
针对这一问题,逗点生物接到相关实验室老师的反馈后,迅速开展了系列实验,探索适合鸡蛋基质的兽残检测填料。经过反复的实验验证,我们发现,专为处理含脂肪和蛋白质较多的复杂基质设计的填料(Copure® HLB-lim pro),能够更好地应对鸡蛋基质中的堵柱问题。该填料采用了独特的表面修饰技术,能够有效捕获并去除鸡蛋中常见的干扰物质,提高分析过程中的分离效率,减少样品的过柱阻力,从而提高兽残的回收率和分析精度。
一、样本处理
样本提取与净化
- 准确称取均匀鸡蛋样品2.5g置于50mL离心管中,准确加入10mL提取液(0.2%甲酸乙腈:水=8:2),涡旋振荡20min后,8000r/min离心5min,取6mL上清液过HLB-lim pro小柱(Copure® HLB-lim pro,200mg,6mL),收集所有流出液。准确移取4mL流出液氮吹至近干,加入1mL 0.1%甲酸水-甲醇(9:1)溶液复溶,超声1min后涡旋混匀,过0.22μm亲水PTFE滤膜。
二、标曲配制
标准工作液配制
- 选同类型鸡蛋空白样品,按上述前处理方法进行操作,准确移取4mL流出液,加入适量的喹诺酮&磺胺&四环素标液后与样品一同氮吹后复溶,上机浓度梯度设置为5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL,制作标准曲线。
三、仪器条件
UPLC-MS/MS( Thermo Fisher TSQ Endura)
色谱柱:Commasil®兽残专用柱(2.1 mm×100 mm,3μm)
流动相:A:水(0.1 %甲酸) B:含0.1 %甲酸的甲醇-乙腈溶液(甲醇:乙腈=2:8)
洗脱方式:梯度洗脱,见表1
流速:0.4 mL/min
柱温:35℃
进样量:3μL
质谱条件:
离子源:HESI
电喷雾电压:3500 V
鞘气压力:40 arb
辅气压力:2 arb
离子传输管:380 ℃
辅气温度:350 ℃
四、实验结果
五、订购信息