
“苏丹红”是一种化学染色剂,并非食品添加剂。它的化学成份中包含一种具有萘环结构的复杂化合物,该化合物具有偶氮结构。这样的化学结构带来的化学性质决定了它具有致癌性,对人体的肝肾器官具有明显的毒性作用。在《国务院办公厅关于印发2010年食品安全整顿工作安排的通知》中也明确规定了苏丹红作为食品添加中的禁用物质,是每年全国食品安全监督抽检中的必检项目。本次实验参照标准《GB/T 19681-2005 食品中苏丹红染料的检测方法 高效液相色谱法》对辣椒粉、辣椒油和辣椒酱等样品中进行不同浓度的加标验证,对实验前处理过程进行了适当优化,实验结果稳定,4种苏丹红的加标回收率均能满足标准要求。
一、 样本前处理
样品提取
a 红辣椒粉等粉状样品
- 称取试样1g均匀样品于50mL离心管中,加入20mL正己烷,振荡提取10min,超声5min后,4000r/min离心5min,上清液收集于另一离心管中,残渣用10mL正己烷重复提取1次,4000r/min离心5min,合并所有正己烷层,40℃氮吹至5mL以下,剩余样品涡旋混合均匀后作为待净化液。
b 辣椒油等油状样品
- 称取1g均匀样品于15mL离心管中,加入3~5mL正己烷,振荡提取5min后作为待净化液。
c 辣椒酱等含水量较大的样品
- 称取10g均匀样品于50mL离心管中,加入30mL提取液(正己烷:丙酮=3:1),涡旋混匀,振荡提取10min,4000r/min离心5min,转移正己烷层,下层用10mL正己烷重复提取2次(共20mL),4000r/min离心5min,合并所有正己烷层,加入10g无水硫酸钠脱水,40℃氮吹至干,加入5mL正己烷复溶完全后作为待净化液。注:(1)辣椒酱类含水量较大的样品的提取液加入无水硫酸钠脱水后,无水硫酸钠残渣需要用5mL正己烷洗涤两次。(2)样品均需重复提取1~2次,避免目标物损失。
净化(Copure® 苏丹红专用柱,1g/6mL)
- 活化:固相萃取柱使用前用10mL正己烷活化小柱
- 上样:待净化液全部转移至小柱中,弃去流出液
- 淋洗:用5mL正己烷淋洗,弃去流出液;(注:上样淋洗过程尽量不要使柱床干涸)
- 洗脱:用30mL 含10%丙酮的正己烷洗脱,收集洗脱液于50mL离心管中,40℃氮吹至近干,加入5mL丙酮溶解残渣,超声2-3min,涡旋复溶。过PTFE滤膜,上机测试。
标准系列工作液
- 吸取适量中间液,用乙腈逐级稀释,得到浓度为0.02μg/mL、0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL。根据样品浓度选择至少5个点建立校准曲线。
二、仪器条件
色谱柱:Copure® C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)
仪器:ThermoFisher U3000液相色谱仪
流动相:A:0.02%磷酸水;B:乙腈
洗脱方式:A:B=5:95 等度洗脱
流速:1 mL/min,柱温:30 ℃,进样量:20μL
检测器:紫外检测器,检测波长:478 nm(苏丹红Ⅰ)、520nm(苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ)
三、实验结果





四、订购信息
