Copure® HLB | GB 5009.284 -2021食品中香兰素、乙基香兰素的测定

GB 5009.284 -2021《食品安全国家标准食品中香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素的测定》于2022.03.07正式实施，同时此方法在食品安全监督抽检实施细则（2022年版）中同时进行了更新。

本方法采用逗点生物Copure^® HLB SPE Cartridge柱，测试了婴儿营养米粉中的香兰素和乙基香兰素，建立了一份具有良好回收率及稳定性，能满足国标要求的SPE-HPLC-MS/MS方法，可供参考。

一、样本前处理

1.1 样品提取

称取1.00g试样，加入10μL内标混合中间液（D3-香兰素及D5-乙基香兰素均为10mg/L），加入10mL水和480μL盐酸溶液，涡旋振荡l min，加入20mL乙睛，涡旋振荡1min，超声提取30min后，加入5g氯化钠，涡旋振荡2min。8000r/min离心5 min，取上清液至玻璃试管，待净化。

1.2 萃取、净化与浓缩 Copure® HLB，30mg/6mL

将得到的上清液于40℃氨吹至近干，加入1mL甲醇溶解残渣，用水定容至10mL，使该样液以小于1mL/min的流速通过固相萃取柱（使用前用3mL甲醇、3mL水活化）。

样液全部流出后，用5mL水淋洗，负压抽干，10mL甲醇-水溶液（4+1）洗脱，负压抽干，收集洗脱液，40℃氨吹至近干，准确加入1mL甲醇-水（4+1）溶液溶解残渣，过0.22um微孔滤膜后，待测。

1.3 标准曲线的制备

精密量取混合标准工作液（香兰素及乙基香兰素均为10mg/L）、内标混合中间液（D3-香兰素及D5-乙基香兰素均为10mg/L）适量，用甲醇-水（4+1）溶液稀释成20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL的系列标准工作液，内标的浓度均为0.1mg/L，临用现配，上机测定。