逗点生物开发出使用固相萃取法检测饮料中酸性橙II 号，其平均回收率80.5%，RSD0.6 %，致力于为客户提供关于酸性橙II 号检测的有效解决方案。
一、实验目的
本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测饮料中酸性橙II号的检测。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。
二、实验目标物
酸性橙II号(CAS: 633-96-5)。
三、应用范围
本方法适用于饮料中酸性橙II号的HPLC检测及确证。
四、实验材料
biocomma® Copure® WAX 60 mg/3 mL(Cat. No. COWAX360)。
五、实验方法
1、样品提取
称2 g橙汁，用水定容到10 mL，过滤后备用。
2、SPE柱净化
(1)活化：WAX使用前用3 mL甲醇活化，3 mL水, 3 mL 2 %的甲酸水溶液平衡。
(2)上样和洗脱：取备用液直接过柱，弃去流出液，依次加3 mL水，3 mL甲醇淋洗，弃去流出液，抽干小柱；用6 mL 10 %氨水甲醇洗脱，收集洗脱液（整个上样、洗脱过程控制流速在1 mL/min内）。
(3)上机测试：洗脱液于40 ℃氮吹至近干，用1 mL水定容，经0.22 μm PES水系滤膜过滤，供上机测试。
3、HPLC条件
设备：Waters Alliance 2695
色谱柱：InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2487 DAD 紫外检测器
检测波长：484 nm
梯度洗脱：A: 0.02 mol/L乙酸铵溶液 B:甲醇
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
六、实验结果
1、1.0 mg/kg饮料基质中酸性橙II号的添加回收结果
表1 1.0 mg/kg饮料基质中酸性橙II号的添加回收结果
2、添加水平为1.0 mg/kg酸性橙II号检测的液相色谱图
图1 添加水平为1.0 mg/kg酸性橙II号检测的液相色谱图
结论：本方法回收率和RSD满足标准要求。