玉米赤霉烯酮的介绍
玉米赤霉烯酮(Zearalenone)又称F-2毒素，它首先从有赤霉病的玉米中分离得到。玉米赤霉烯酮具有雌激素作用，主要作用于生殖系统，可使家畜，家禽和实验小鼠产生雌性激素亢进症。妊娠期的动物(包括人)食用含玉米赤霉烯酮的食物可引起流产、死胎和畸胎。食用含赤霉病麦面粉制作的各种面食也可引起中枢神经系统的中毒症状，如恶心、发冷、头痛、神智抑郁和共济失调等。
玉米赤霉烯酮的限量标准
根据《GB 2761-2017 食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》规定谷物及其制品中玉米赤霉烯酮最大允许限量为60 μg/kg
一、实验目的
本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测猪肉中的玉米赤霉烯酮含量。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。
二、实验目标物
玉米赤霉烯酮（CAS:17924-92-4）。
三、应用范围
本方法适用于动物源性食品中玉米赤霉烯酮的检测。
四、参考标准
《GB 5009.209-2016食品安全国家标准 食品中玉米赤霉烯酮的测定》。
五、实验材料
biocomma® Copure® HLB固相萃取柱150 mg/6 mL (Cat. No. COHLB6150)。
六、实验方法
1、样品提取及稀释
准确称取猪肉试样5.0 g试样（精确至0.01 g ）于50 mL离心管中加入10 mL 0.05 M乙酸钠缓冲液和25 μL β-葡萄糖/硫酸脂复合酶，混匀，于37℃水浴中放置12 h。水解后加入10 mL乙腈，并加入200 μL 1 M的NaOH溶液，振荡30 min，4000r/min离心3 min，移取上清液10 mL，用30 mL pH=7.4 的PBS溶液稀释，混匀，用滤纸过滤，收集于50 mL的离心管中，备用。
2、SPE柱净化
(1)活化：净化前用5 mL甲醇活化，5 mL的水平衡。
(2)上样和洗脱：取10 mL备用液进行上样，将备用液以1 mL/min的速度过柱，弃去滤液，依次用5 mL水，5 mL 50%甲醇水溶液淋洗，弃去淋洗液，将小柱抽干，再用10 mL甲醇洗脱并收集洗脱液。
(3)重新溶解：40 ℃缓慢氮吹至近干，加1 mL乙腈溶解，涡旋混合1 min，过0.22 μm有机滤膜，待上机测试。
3、HPLC条件
设备：Waters Alliance 2695
色谱柱：InerSustain®-C18 (4.6 mmX250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2475荧光检测器
检测波长：激发波长：274 nm 发射波长：440 nm
流动相：A:水 B：乙腈 C:甲醇
洗脱方式：等度洗脱 A:B:C=46:46:8
流速：1 mL/min
进样体积：20 μL
七、实验结果
1、0.24 mg/kg 猪肉中玉米赤霉烯酮的添加回收结果
表1 0.24 mg/kg 猪肉中玉米赤霉烯酮的添加回收结果
2、添加水平为0.24 mg/kg 猪肉中玉米赤霉烯酮的添加回收结果
图1 添加水平为0.24 mg/kg 猪肉中玉米赤霉烯酮的添加回收结果
本方法回收率和RSD满足标准要求。