酸奶中有机酸的介绍:
酸奶是以牛奶为原料,经发酵之后的一种牛奶制品。有机酸是酸乳中的重要因素,具有抑菌、抗病毒等作用。有机酸不仅是酸乳发酵的重要指标,也是酸乳的主要风味和营养物质之一和天然防腐剂,其含量高低于酸乳的品质有密切关系。
《GB5009.157-2016食品中有机酸的测定》规定了食品中酒石酸、乳酸、柠檬酸等七种有机酸的检测方法。有机酸是目前食品领域内采用的比较普遍的酸味剂,可以提高食品的风味,食品中一部分的有机酸是食品中固有的或者是工艺中形成的,但是仍然有一部分有机酸是人为添加的,因此检测食品中的有机酸的含量是很有必要的。
逗点生物根据《GB5009.157-2016食品中有机酸的测定》,利用biocomma® Copure® SAX固相萃取柱作为酸奶中有机酸检测的样品前处理方法,HPLC法为检测手段,开发出酸奶中有机酸的测试方法。
实验耗材:
biocomma® Copure® SAX固相萃取柱500mg/6mL(Cat. No. COSAX6500)
样品前处理:
准确移取酸奶5.0 g于50 mL离心管中加入水至50 mL涡旋1 min分散均匀。4500 r / min离心10 min。取上清液10 mL,备用。
SPE柱净化:
- 1.活化:biocomma® Copure® SAX固相萃取柱使用前用6 mL甲醇、6 mL 水活化;
- 2.上样:往固相萃取柱中加入提取备用液5 mL,弃去流出液;
- 3.淋洗:在SPE柱上加入3 mL水淋洗,弃去淋洗液;
- 4.洗脱:用2mL 6%盐酸水溶液洗脱,收集洗脱液(整个上样淋洗洗脱过程中流速保持 <1 mL/min);
- 5.洗脱液定容至2 mL,0.22 μm滤膜过滤,滤液上机测试。
HPLC条件:
- 设备:Waters Alliance 2695
- 色谱柱 :Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250mm)
- 检测器 :Waters 2487 紫外检测器
- 流动相: A:甲醇 B:0.025 mol/L磷酸二氢钾(PH:2.5)
- 等度洗脱 : A: B=5:95
- 流速:1.0 mL/min
- 检测波长:214 nm
- 进样体积:20 μL
实验结果:
400 mg/Kg 酸奶中酒石酸和柠檬酸的添加回收结果
实验结论:
采用biocomma® Copure® SAX固相萃取柱可以有效的用于酸奶中的有机酸含量的测定,酒石酸和柠檬酸检测的回收率在85-95%左右,符合国标的标准要求。同时,biocomma® Copure® SAX固相萃取柱仍然可以用来作为食品中的其他固体、液体等基质中的有机酸的测定。