实验导读
测定苏丹红时，实验室通常会选择中性氧化铝柱或分子印迹柱净化样品。然而在处理复杂基质时，往往存在回收率低、操作流程复杂、净化效果差等问题。逗点生物针对此类情况特推出Copure® CLB苏丹红专用净化柱，该专用柱不同于中性氧化铝柱或分子印迹柱，可针对性解决如上问题，同时也为食品中苏丹红检测提出优化解决方案。
逗点生物以辣椒粉为基质，进行了0.2 mg/kg、0.5 mg/kg、1.0 mg/kg低中高三个浓度水平的加标实验。实验结果显示，用CLB苏丹红专用净化柱处理辣椒粉样品后，苏丹红的回收率在83% ~ 101%之间，RSD 在5 %以内，该方法稳定可靠、灵敏度高，能够作为苏丹红样品测定，特别是复杂样品测定的一个优选方案。
一、样品提取
准确称取辣椒粉样品1.0 g（精确至0.01 g），加入10 mL乙腈，涡旋混匀，超声提取10 min，8000 r/min 离心3 min，取上清液于另一干净离心管中，重复上述操作一次，合并两次提取液，取其中10 mL 50 ℃下氮吹至5 mL以下，加入等体积2% 氢氧化钠水溶液，再加入适量纯净水（约1 ~ 2 mL），涡旋混匀，待净化。
二、样品净化
配制平衡液：取一定量乙腈，加入等体积2%氢氧化钠水溶液，再加入适量超纯水，直至混匀成均相体系，不分层，此为平衡液。
净化小柱：Copure® CLB苏丹红专用净化柱
活化和平衡：乙腈6 mL，平衡液5 mL依次过柱
上样：将样品提取后的待净化液过柱，并用平衡液5 mL分两次冲洗离心管，一并过柱
淋洗：先加超纯水6 mL过柱淋洗，再加入乙腈淋洗，直至淋洗流出液呈无色，最后加入乙酸乙酯5 mL淋洗
洗脱：5 mL 5%甲酸乙酸乙酯溶液洗脱
收集全部洗脱液，50 ℃下氮吹至干，用1 mL乙腈复溶，过PTFE膜，待上机。
三、仪器条件
仪器：UltiMate 3000（Thermofisher Scientific），配DAD检测器
色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18（4.6 mm×250mm，5 μm）
流动相：乙腈/0.2%磷酸水=95/5（V/V）
流速：1 mL/min
柱温：30 ℃
进样量：20 μL
检测波长：478 nm、520nm
四、实验结果
仪器：UltiMate 3000（Thermofisher Scientific），配DAD检测器
色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18（4.6 mm×250mm，5 μm）
流动相：乙腈/0.2%磷酸水=95/5（V/V）
流速：1 mL/min
柱温：30 ℃
进样量：20 μL
检测波长：478 nm、520nm
加标浓度为 1 mg/kg 的辣椒粉使用分子印迹柱（上图）及 CLB 苏丹红专用净化柱（下图）前处理后上机对比图，基质效应减弱，目标峰可准确积分。
备注：其它基质的样品可以参照此方案的前处理方法做细微调整。
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关于逗点
深圳逗点生物技术有限公司（Biocomma Limited）成立于2006年，是一家集研发、生产、国内外销售、OEM服务于一体的高新技术企业集团。公司秉承更好滤芯、更好样本前处理的愿景，不断开拓创新，打造了多孔塑料、分离材料、精密注塑三大技术平台，现已发展为分子诊断与色谱质谱样本前处理工具、实验室耗材的领先制造商。
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