应用 | 蜂蜜中链霉素和双氢链霉素的测定

链霉素和双氢链霉素属于氨基糖苷类抗生素，对革兰氏阴性菌具有抑菌活性，可以预防多种动物疾病。在养蜂行业中，链霉素和双氢链霉素能够有效地治疗蜜蜂的腐蛆病，但由于管理和使用的不科学，常造成蜂产品中该类物质的残留。

本实验参考国标BJS 202103,对样品前处理进行优化后，建立了一个稳定可靠，回收率高，且适合动物源性蜂蜜中链霉素和双氢链霉素残留量测定的SPE-UPLC-MS/MS方法。

一、样品提取

准确称取5 g试样于50 mL离心管中，加入10 mL 提取液（含2 %三氯乙酸的磷酸盐缓冲溶液），涡旋混匀1 min，超声提取10 min，再加入10 mL提取液并定容至25 mL，涡旋混匀1 min后超声提取5 min，在10000 r/min离心5 min，待净化。

二、样品净化（Copure^®HLB,60 mg/3mL ）

活化：依次用3 mL甲醇，3 mL水活化Copure^® HLB固相萃取小柱；

上样：取5 mL待净化液至已活化好的固相萃取小柱；

淋洗：用2mL水淋洗固相萃取小柱两次，抽干小柱；

洗脱：用1 mL 甲酸-乙腈-水（2:10:88，v:v:v）溶液洗脱，收集洗脱液，用2 %氨化乙腈1 mL定容至2 mL，涡漩，过滤膜，上机测试。

三、标曲配制

选同类型空白样品，依次加入适量混合标准中间溶液，按照样品提取和净化的步骤进行操作，配制成上机浓度分别为2.5 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL的标准曲线。

四、仪器条件（Thermo Fisher TSQ Endura）

【液相部分】

色谱柱： Hilic (2.1 mm×100 mm,2.7 μm)

流动相：A：5 mmol/L乙酸铵溶液（含0.3 %甲酸）  B：乙腈（含0.3 %甲酸）

流速：0.3 mL/min   柱温：35℃   进样量：10 μL

洗脱程序：梯度洗脱表1

【质谱条件】

离子源：HESI  

电喷雾电压：3500 V

鞘气压力：40 arb  

辅气压力：10 arb

离子传输管：350 ℃  

辅气温度：375 ℃

五、实验结果

【测试数据】

【测试色谱图】

六、订购信息