本方案建立了以C18固相萃取柱对猪肉样品中4种喹诺酮类药物萃取净化方法,进行低中高三水平基质加标,都能获得满意的实验结果,回收率介于84%~115%之间,RSD值小于10 %。

一、样品提取

准确称取粉碎均匀的猪肉样品2.0 g于干净离心管中,加入10 mL 5%甲酸乙腈溶液,再加入1 g NaCl,2500 r/min涡旋提取10 min,8000 r/min离心2 min,取上清液5 mL氮吹近干,用5 mL 5 %甲酸水溶液复溶,待净化。

二、样品净化

活化:5 mL甲醇,5 mL水

上样:上述待净化液

淋洗:5 mL 10 %甲醇水

洗脱:5 mL 10 %氨水甲醇

收集洗脱液,氮吹近干,初始流动相复溶,上机。

三、基质标准曲线溶液的制备

选同类型空白猪肉样品,按上述前处理方法进行操作,取适量的标液配制成合适浓度的基质曲线。

四、色谱条件

仪器:UPLC-MS/MS(Thermo Fisher TSQ Endura)

色谱柱:菲罗门 Titank C18 (2.1 mm×50 mm,3 μm)

流动相:A:水(0.1 %甲酸)   B:甲醇(0.1 %甲酸)

洗脱方式:梯度洗脱,见表1

流速:0.3 mL/min

柱温:30℃

进样量:5 μL

表1 梯度洗脱程序

五、质谱条件

离子源:HESI

电喷雾电压:3500 V

鞘气压力:40 arb

辅气压力:2 arb      

离子传输管:380 ℃

辅气温度:350 ℃

表2 组分名称、保留时间及特征
离子一览表(*为定量离子)

六、实验结果

表3 4种喹诺酮类加标回收实验结果
图1 添加水平为50.0 μg/kg时
4种喹诺酮类的总离子流图
表4  4种喹诺酮类基质曲线信息

七、订购信息

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