磺胺类药物廉价且高效,常用于生猪的疾病防治,有时甚至作为饲料添加剂用来促生长或增产,但是过量使用会导致其在猪肉中残留。 研究显示,磺胺类药物代谢时间长且有蓄积,食用磺胺类药物残留的生鲜猪肉存在极大的健康风险。

猪肉中脂质含量在20%~30%,磷脂含量在1%~3%,在对这类高脂质样品进行检测和分析时,萃取的磷脂会在色谱柱上聚集,影响色谱柱使用寿命。 同时,磷脂会使质谱信号产生离子抑制,导致质谱分析中的低回收率,进而影响仪器分析的灵敏度和方法的重现性,这给我们对高脂质样品进行兽药残留检测提出了更高要求。

磺胺专用QuEChERS净化管

为应对这一挑战,逗点生物采用最新研发的磷脂去除磺胺专用QuEChERS净化管,能够有效实现样品中的磷脂去除和脂质吸附。建立了采用QuEChERS方法检测猪肉中19种磺胺类兽药残留的LC-MS/MS方法。

该方法(5 ng/g和10 ng/g)两个水平的加标回收率均在60-120 %之间,RSD小于10 %,操作简便快捷,与国内外的竞品相比,具有较高的回收率和良好的磷脂去除和脂质净化效果,能够作为猪肉中磺胺类兽药残留检测的参考方法。

一、样品前处理

1.1样品提取

将猪肉样品粉碎均匀,称取2.0 g猪肉于50 mL离心管中,加入4 mL水,涡旋混匀2 min;再加10 mL 1% 乙酸乙腈涡旋混匀10 min; 之后再加入QuEChERS盐包(Cat. No. COQ050050H),涡旋2 min,在4℃下5000 r/min离心5 min。静置15 min,上层乙腈层待净化。

1.2样品净化

取待净化的上层乙腈层6 mL于15 mL 磺胺专用QuEChERS净化管(Cat. No. COQ015427)中, 涡旋 2 min,5000 r/min离心5 min。取上清液4 mL乙腈层转移至另一试管中,40℃下氮气吹干,用含0.1 %甲酸的甲醇-水溶液(水:甲醇=9:1溶液)定容至1 mL,过0.22 μm滤膜,待上机测试。

二、仪器条件

2.1色谱条件

仪器:UPLC-MS/MS

Thermo Fisher TSQ Endura

色谱柱:Commasil®兽残专用柱

2.1 mm×100 mm,3 μm

流动相:A:水(0.1 %甲酸)   B:含0.1 %甲酸的甲醇-乙腈溶液(甲醇:乙腈=2:8)

洗脱方式:梯度洗脱,见表1

流速:0.3 mL/min

柱温:35℃

进样量:10 μL

表1 梯度洗脱程序

2.2质谱条件

离子源:HESI

电喷雾电压:3500 V

鞘气压力:40 arb

辅气压力:2 arb      

离子传输管:380 ℃

辅气温度:350 ℃

表2 组分名称、保留时间
及特征离子一览表(*为定量离子)

三、实验结果

表3  19种磺胺类兽药加标回收实验结果
图1 不同品牌净化处理猪肉样品后的TIC图
子离子扫描m/z=184
①猪肉样品-未净化处理
②国外A品牌-净化处理
③国外S品牌-净化处理
④国外B品牌-净化处理
⑤逗点生物Copure®-净化处理
图2 添加水平为5 ng/g时猪肉样品中19种磺胺类兽残TIC色谱图

四、订购信息

如感兴趣,欢迎垂询

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